中国预防兽医学报
中國預防獸醫學報
중국예방수의학보
CHINESE JOURNAL OF PREVENTIVE VETERINARY MEDICINE
2003年
2期
99-103
,共5页
王鹏雁%陈创夫%余兴龙%徐兴然%涂长春%张高轩
王鵬雁%陳創伕%餘興龍%徐興然%塗長春%張高軒
왕붕안%진창부%여흥룡%서흥연%도장춘%장고헌
轮状病毒%保护性抗原%基因克隆
輪狀病毒%保護性抗原%基因剋隆
륜상병독%보호성항원%기인극륭
用反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)技术,从轮状病毒感染的细胞中扩增816bp、916bp的VP4、VP7片段中抗原表位区.通过T4DNA连接酶将其直接连接于克隆载体质粒pGEM-T上,转化至受体菌DH5α中.提取质粒经PCR扩增、酶切鉴定,证明重组质粒pT-V4、PT-V7中含有轮状病毒的VP4、VP7基因片段.经核苷酸序列分析,表明克隆了轮状病毒主要保护性抗原VP4、VP7基因中抗原表位区.
用反轉錄聚閤酶鏈式反應(RT-PCR)技術,從輪狀病毒感染的細胞中擴增816bp、916bp的VP4、VP7片段中抗原錶位區.通過T4DNA連接酶將其直接連接于剋隆載體質粒pGEM-T上,轉化至受體菌DH5α中.提取質粒經PCR擴增、酶切鑒定,證明重組質粒pT-V4、PT-V7中含有輪狀病毒的VP4、VP7基因片段.經覈苷痠序列分析,錶明剋隆瞭輪狀病毒主要保護性抗原VP4、VP7基因中抗原錶位區.
용반전록취합매련식반응(RT-PCR)기술,종륜상병독감염적세포중확증816bp、916bp적VP4、VP7편단중항원표위구.통과T4DNA련접매장기직접련접우극륭재체질립pGEM-T상,전화지수체균DH5α중.제취질립경PCR확증、매절감정,증명중조질립pT-V4、PT-V7중함유륜상병독적VP4、VP7기인편단.경핵감산서렬분석,표명극륭료륜상병독주요보호성항원VP4、VP7기인중항원표위구.
