CAJ | 학술논문

目的:观察细胞因子EGF和bFGF联合诱导人脐血间充质于细胞(MSCs)向神经细胞分化过程中细胞巢蛋白(nestin)、神经丝亚单位M(NF-M)和端粒酶逆转录酶(hTERT)mRNA的变化.方法:采集健康自然分娩产妇脐血,密度梯度离心分离单个核细胞(MNCs),PBS洗涤2次后重悬于含体积分数20%胎牛血清的DMEM/F12中,接种于T-75培养瓶内(细胞密度为1×106ml-1),一组加入细胞因子EGF和bFGF,终浓度各为10μg/L,另一组不加细胞因子,剩余细胞用液氮冻存.培养24 h倾去全部液体以除去未贴壁细胞,以后每3 d全量换液1次,倒置显微镜下观察细胞形态.分别收集培养1d、4d、7d、14d贴壁细胞和冻存细胞,采用RT-PCR方法检测nestin、NF-M、hTERT mRNA的表达.结果:未培养的脐血MNCs(内含MSCs)nestin、NF-M、hTERT mRNA均表达阳性.培养后nestin、hTERT mRNA表达下降,至第7 d已不能检出;而NF-M mRNA的表达随培养时间延长而增强.与对照组相比,细胞因子组NF-M mRNA表达较高,nestin、hTERT mRNA表达的下降趋势延迟.结论:细胞因子EGF和bFGF在联合诱导脐血MSCs分化为神经细胞的过程中,能下调hTERT mRNA的表达.
목적:관찰세포인자EGF화bFGF연합유도인제혈간충질우세포(MSCs)향신경세포분화과정중세포소단백(nestin)、신경사아단위M(NF-M)화단립매역전록매(hTERT)mRNA적변화.방법:채집건강자연분면산부제혈,밀도제도리심분리단개핵세포(MNCs),PBS세조2차후중현우함체적분수20%태우혈청적DMEM/F12중,접충우T-75배양병내(세포밀도위1×106ml-1),일조가입세포인자EGF화bFGF,종농도각위10μg/L,령일조불가세포인자,잉여세포용액담동존.배양24 h경거전부액체이제거미첩벽세포,이후매3 d전량환액1차,도치현미경하관찰세포형태.분별수집배양1d、4d、7d、14d첩벽세포화동존세포,채용RT-PCR방법검측nestin、NF-M、hTERT mRNA적표체.결과:미배양적제혈MNCs(내함MSCs)nestin、NF-M、hTERT mRNA균표체양성.배양후nestin、hTERT mRNA표체하강,지제7 d이불능검출;이NF-M mRNA적표체수배양시간연장이증강.여대조조상비,세포인자조NF-M mRNA표체교고,nestin、hTERT mRNA표체적하강추세연지.결론:세포인자EGF화bFGF재연합유도제혈MSCs분화위신경세포적과정중,능하조hTERT mRNA적표체.