CAJ | 학술논문

目的:传代和压力负荷都是影响软骨细胞表型的因素.单层培养的关节软骨细胞在培养过程中随着传代逐渐失去了典型软骨细胞的形态学特征,变得像成纤维细胞,而且II型胶原的分泌减少,失去了软骨细胞特异性,即出现了反分化[1].Lee MS等发现,某些机械应力可诱导软骨细胞凋亡,改变软骨细胞的新陈代谢,也会导致关节软骨的退变[2].在适当的应力刺激下,软骨细胞可以通过调节基质代谢来适应压力,但在过度或持续的应力下软骨细胞就可能产生各种病理改变[3].本试验将兔软骨细胞放在静水压力负载装置中培养,并传代,在生理水平的流体静态压力范围内(0.115 MPa)[4]施加不同大小的循环静水压,以及不同大小的持续静水压,观察其对兔软骨细胞损伤和表型的影响.方法:试验组循环加压组分为O.15 MPa、0.5 Mpa、1 MPa三个小组,对照组为持续加压组(分为0.15 MPa,0.5 MPa,1 MPa三个小组)和常压持续培养组.用酶消化法获取兔关节软骨细胞,在静水压力负载装置中按照上述分组作普通培养瓶贴壁的单层培养,并传代.检测Ⅰ型胶原和Ⅱ型胶原免疫组化,苏木素套核染色,倒置显微镜观察摄影.以RT-PCR方法检测软骨细胞中Proteoglycan,Aggrecan,Ⅰ型胶原和Ⅱ型胶原mRNA的表达.结果:在循环静水压力下培养,软骨细胞有较高的细胞增殖率,Ⅱ型胶原,Proteoglycan和Aggrecan等表达增加.生理水平的循环静水压越高,软骨细胞表型越稳定.常压持续培养在第6代开始出现表型改变;持续静水压力培养的软骨细胞更早失去软骨细胞的特有表型,并且持续静水压力越大,表型改变越早.结论:在生理水平的静水压范围内一定频率和大小的循环静水压力能维持或促进软骨细胞的合成分泌功能,有助于软骨细胞特有表型的稳定.
목적:전대화압력부하도시영향연골세포표형적인소.단층배양적관절연골세포재배양과정중수착전대축점실거료전형연골세포적형태학특정,변득상성섬유세포,이차II형효원적분비감소,실거료연골세포특이성,즉출현료반분화[1].Lee MS등발현,모사궤계응력가유도연골세포조망,개변연골세포적신진대사,야회도치관절연골적퇴변[2].재괄당적응력자격하,연골세포가이통과조절기질대사래괄응압력,단재과도혹지속적응력하연골세포취가능산생각충병리개변[3].본시험장토연골세포방재정수압력부재장치중배양,병전대,재생리수평적류체정태압력범위내(0.115 MPa)[4]시가불동대소적순배정수압,이급불동대소적지속정수압,관찰기대토연골세포손상화표형적영향.방법:시험조순배가압조분위O.15 MPa、0.5 Mpa、1 MPa삼개소조,대조조위지속가압조(분위0.15 MPa,0.5 MPa,1 MPa삼개소조)화상압지속배양조.용매소화법획취토관절연골세포,재정수압력부재장치중안조상술분조작보통배양병첩벽적단층배양,병전대.검측Ⅰ형효원화Ⅱ형효원면역조화,소목소투핵염색,도치현미경관찰섭영.이RT-PCR방법검측연골세포중Proteoglycan,Aggrecan,Ⅰ형효원화Ⅱ형효원mRNA적표체.결과:재순배정수압력하배양,연골세포유교고적세포증식솔,Ⅱ형효원,Proteoglycan화Aggrecan등표체증가.생리수평적순배정수압월고,연골세포표형월은정.상압지속배양재제6대개시출현표형개변;지속정수압력배양적연골세포경조실거연골세포적특유표형,병차지속정수압력월대,표형개변월조.결론:재생리수평적정수압범위내일정빈솔화대소적순배정수압력능유지혹촉진연골세포적합성분비공능,유조우연골세포특유표형적은정.