中国老年学杂志
中國老年學雜誌
중국노년학잡지
CHINESE JOURNAL OF GERONTOLOGY
2008年
9期
847-850
,共4页
张海风%臧明玺%单杰%安玉会%李道明
張海風%臧明璽%單傑%安玉會%李道明
장해풍%장명새%단걸%안옥회%리도명
硝普钠(SNP)%体外培养%海马神经元%凋亡%NF-κB p65%caspase-3
硝普鈉(SNP)%體外培養%海馬神經元%凋亡%NF-κB p65%caspase-3
초보납(SNP)%체외배양%해마신경원%조망%NF-κB p65%caspase-3
目的 探讨NO供体硝普钠(SNP)诱导体外培养的海马神经元凋亡与核因子-kappaB(NF)-κB p65和caspase-3表达变化的关系.方法 终浓度分别为0、25、50、100、200、400 μmol/L的SNP处理海马神经元24 h,用MTT比色法分析细胞存活率;Hcechst3258荧光染色观察凋亡的形态学改变;DNA琼脂糖凝胶分析凋亡的生化特征;用RT-PCR检测NF-κB p65、caspase-3mRNA表达变化;Westem印迹检测NF-κB p65、caspase-3蛋白表达的变化.结果 SNP可剂量依赖性的降低神经元的存活率;荧光显微镜可见染为高亮蓝色的典型凋亡小体,其细胞核明显固缩、凝聚和断裂;电泳图谱显示清晰的DNA梯度.随着SNP剂量的增加,NF-KB p65 mRNA、NF-κB p65蛋白表达逐渐增加;caspase-3 mRNA表达无改变,但caspase-3酶原被裂解活化;从50μmol/L SNP起,caspase-3相对酶活性显著增加,为对照组的3.02倍,100μmol/L达最大值.结论 SNP可诱导培养的海马神经元凋亡,其凋亡机制可能与增加NF-κB p65表达及激活caspase-3酶原有关.
目的 探討NO供體硝普鈉(SNP)誘導體外培養的海馬神經元凋亡與覈因子-kappaB(NF)-κB p65和caspase-3錶達變化的關繫.方法 終濃度分彆為0、25、50、100、200、400 μmol/L的SNP處理海馬神經元24 h,用MTT比色法分析細胞存活率;Hcechst3258熒光染色觀察凋亡的形態學改變;DNA瓊脂糖凝膠分析凋亡的生化特徵;用RT-PCR檢測NF-κB p65、caspase-3mRNA錶達變化;Westem印跡檢測NF-κB p65、caspase-3蛋白錶達的變化.結果 SNP可劑量依賴性的降低神經元的存活率;熒光顯微鏡可見染為高亮藍色的典型凋亡小體,其細胞覈明顯固縮、凝聚和斷裂;電泳圖譜顯示清晰的DNA梯度.隨著SNP劑量的增加,NF-KB p65 mRNA、NF-κB p65蛋白錶達逐漸增加;caspase-3 mRNA錶達無改變,但caspase-3酶原被裂解活化;從50μmol/L SNP起,caspase-3相對酶活性顯著增加,為對照組的3.02倍,100μmol/L達最大值.結論 SNP可誘導培養的海馬神經元凋亡,其凋亡機製可能與增加NF-κB p65錶達及激活caspase-3酶原有關.
목적 탐토NO공체초보납(SNP)유도체외배양적해마신경원조망여핵인자-kappaB(NF)-κB p65화caspase-3표체변화적관계.방법 종농도분별위0、25、50、100、200、400 μmol/L적SNP처리해마신경원24 h,용MTT비색법분석세포존활솔;Hcechst3258형광염색관찰조망적형태학개변;DNA경지당응효분석조망적생화특정;용RT-PCR검측NF-κB p65、caspase-3mRNA표체변화;Westem인적검측NF-κB p65、caspase-3단백표체적변화.결과 SNP가제량의뢰성적강저신경원적존활솔;형광현미경가견염위고량람색적전형조망소체,기세포핵명현고축、응취화단렬;전영도보현시청석적DNA제도.수착SNP제량적증가,NF-KB p65 mRNA、NF-κB p65단백표체축점증가;caspase-3 mRNA표체무개변,단caspase-3매원피렬해활화;종50μmol/L SNP기,caspase-3상대매활성현저증가,위대조조적3.02배,100μmol/L체최대치.결론 SNP가유도배양적해마신경원조망,기조망궤제가능여증가NF-κB p65표체급격활caspase-3매원유관.
