高技术通讯
高技術通訊
고기술통신
HIGH TECHNOLOGY LETTERS
2008年
6期
657-660
,共4页
半滑舌鳎%肝脏细胞系%核型%GFP报告基因
半滑舌鰨%肝髒細胞繫%覈型%GFP報告基因
반활설탑%간장세포계%핵형%GFP보고기인
以半滑舌鳎肝脏组织为材料,探索了组织细胞分离培养条件,建立了半滑舌鳎组织细胞培养技术及半滑舌鳎肝脏细胞系(HTLC).该细胞系的培养基是添加了抗生素、胎牛血清(FBS)、花鲈血清(SPS)、成纤维生长因子(bFGF)的MEM.HTLC形态呈纤维状,在培养基中生长迅速,经200多天的培养,成功传代30多代.检测了温度、FBS浓度、bFGF对其生长的影响,结果表明,在24～30℃生长良好,但当温度低于12℃时细胞生长速度明显减慢;在一定浓度范围内,其生长速度随血清浓度的升高而增快,血清浓度过高或过低对其生长不利;在培养基中添加bFGF可以使细胞生长速度显著提高;其二倍体核型为2n=21t.将绿色荧光蛋白(GFP)报告基因通过脂质体介导的方法转入HTLC中并成功地获得了表达,转化率为20%左右.该细胞系的建立为研究鱼类病毒学、免疫学、遗传学、功能基因组学提供了很好的实验材料.
以半滑舌鰨肝髒組織為材料,探索瞭組織細胞分離培養條件,建立瞭半滑舌鰨組織細胞培養技術及半滑舌鰨肝髒細胞繫(HTLC).該細胞繫的培養基是添加瞭抗生素、胎牛血清(FBS)、花鱸血清(SPS)、成纖維生長因子(bFGF)的MEM.HTLC形態呈纖維狀,在培養基中生長迅速,經200多天的培養,成功傳代30多代.檢測瞭溫度、FBS濃度、bFGF對其生長的影響,結果錶明,在24～30℃生長良好,但噹溫度低于12℃時細胞生長速度明顯減慢;在一定濃度範圍內,其生長速度隨血清濃度的升高而增快,血清濃度過高或過低對其生長不利;在培養基中添加bFGF可以使細胞生長速度顯著提高;其二倍體覈型為2n=21t.將綠色熒光蛋白(GFP)報告基因通過脂質體介導的方法轉入HTLC中併成功地穫得瞭錶達,轉化率為20%左右.該細胞繫的建立為研究魚類病毒學、免疫學、遺傳學、功能基因組學提供瞭很好的實驗材料.
이반활설탑간장조직위재료,탐색료조직세포분리배양조건,건립료반활설탑조직세포배양기술급반활설탑간장세포계(HTLC).해세포계적배양기시첨가료항생소、태우혈청(FBS)、화로혈청(SPS)、성섬유생장인자(bFGF)적MEM.HTLC형태정섬유상,재배양기중생장신속,경200다천적배양,성공전대30다대.검측료온도、FBS농도、bFGF대기생장적영향,결과표명,재24～30℃생장량호,단당온도저우12℃시세포생장속도명현감만;재일정농도범위내,기생장속도수혈청농도적승고이증쾌,혈청농도과고혹과저대기생장불리;재배양기중첨가bFGF가이사세포생장속도현저제고;기이배체핵형위2n=21t.장록색형광단백(GFP)보고기인통과지질체개도적방법전입HTLC중병성공지획득료표체,전화솔위20%좌우.해세포계적건립위연구어류병독학、면역학、유전학、공능기인조학제공료흔호적실험재료.
