广西农业生物科学
廣西農業生物科學
엄서농업생물과학
JOURNAL OF GUANGXI AGRICULTURAL AND BIOLOGICAL SCIENCE
2008年
4期
329-334
,共6页
戢开丽%仇恒滨%严为巧%庄新杰%段亚苹%张明%卢盛晟%卢克焕
戢開麗%仇恆濱%嚴為巧%莊新傑%段亞蘋%張明%盧盛晟%盧剋煥
집개려%구항빈%엄위교%장신걸%단아평%장명%로성성%로극환
昆明小鼠%囊胚%胚胎干细胞%机械法%酶消化法
昆明小鼠%囊胚%胚胎榦細胞%機械法%酶消化法
곤명소서%낭배%배태간세포%궤계법%매소화법
以昆明小鼠(Mus musculus)为材料,利用超数排卵获得小鼠扩展囊胚、孵化囊胚.为了研究小鼠胚胎干细胞(Mouse Embryonic Stem Cells,mESC)分离和传代的影响因素,设计两个实验:(1)不同孕期(3.5 d或4.5 d)的囊胚对胚胎干细胞分离效率的影响;(2)第5代后,不同传代方法(机械法或酶消化法)对mESC传代的影响.结果显示:在3.5 d孕期时,胚胎为扩展囊胚,在4.5 d时为孵化囊胚,扩展囊胚在贴壁率、原代克隆形成率差异不显著,从在继代培养上显著高于孵化囊胚(P<0.05);第5代后用机械法或胰酶消化法传代对mESC的维持没有明显差别,但从克隆的形态上看,酶消化法优于机械法.最后,本研究从扩展囊胚组中成功获得了一株mESC,该mESC碱性磷酸酶染色呈强阳性,经RT-PCR分析显示表达Oct4、Sox2,核型为正常40XY.
以昆明小鼠(Mus musculus)為材料,利用超數排卵穫得小鼠擴展囊胚、孵化囊胚.為瞭研究小鼠胚胎榦細胞(Mouse Embryonic Stem Cells,mESC)分離和傳代的影響因素,設計兩箇實驗:(1)不同孕期(3.5 d或4.5 d)的囊胚對胚胎榦細胞分離效率的影響;(2)第5代後,不同傳代方法(機械法或酶消化法)對mESC傳代的影響.結果顯示:在3.5 d孕期時,胚胎為擴展囊胚,在4.5 d時為孵化囊胚,擴展囊胚在貼壁率、原代剋隆形成率差異不顯著,從在繼代培養上顯著高于孵化囊胚(P<0.05);第5代後用機械法或胰酶消化法傳代對mESC的維持沒有明顯差彆,但從剋隆的形態上看,酶消化法優于機械法.最後,本研究從擴展囊胚組中成功穫得瞭一株mESC,該mESC堿性燐痠酶染色呈彊暘性,經RT-PCR分析顯示錶達Oct4、Sox2,覈型為正常40XY.
이곤명소서(Mus musculus)위재료,이용초수배란획득소서확전낭배、부화낭배.위료연구소서배태간세포(Mouse Embryonic Stem Cells,mESC)분리화전대적영향인소,설계량개실험:(1)불동잉기(3.5 d혹4.5 d)적낭배대배태간세포분리효솔적영향;(2)제5대후,불동전대방법(궤계법혹매소화법)대mESC전대적영향.결과현시:재3.5 d잉기시,배태위확전낭배,재4.5 d시위부화낭배,확전낭배재첩벽솔、원대극륭형성솔차이불현저,종재계대배양상현저고우부화낭배(P<0.05);제5대후용궤계법혹이매소화법전대대mESC적유지몰유명현차별,단종극륭적형태상간,매소화법우우궤계법.최후,본연구종확전낭배조중성공획득료일주mESC,해mESC감성린산매염색정강양성,경RT-PCR분석현시표체Oct4、Sox2,핵형위정상40XY.
