中国畜牧兽医
中國畜牧獸醫
중국축목수의
CHINA ANIMAL HUSBANDRY & VETERINARY MEDICINE
2009年
3期
58-62
,共5页
邱璜%夏平安%卢高峰%王中明%刘明莉%李伟娟%党占国
邱璜%夏平安%盧高峰%王中明%劉明莉%李偉娟%黨佔國
구황%하평안%로고봉%왕중명%류명리%리위연%당점국
PRRSV%ORF5基因%tPA信号肽%原核表达载体
PRRSV%ORF5基因%tPA信號肽%原覈錶達載體
PRRSV%ORF5기인%tPA신호태%원핵표체재체
根据GenBank(序列号E00896)上公布的人组织型纤溶酶原激活因子(tissue plasminogen activator,tPA)的序列,利用在线信号肽分析工具Signal P3.0 Server预测出人tPA的信号肽共有63 bp,设计1对能互为模板直接进行扩增的特异性引物.通过重叠PCR的方法扩增出tPA信号肽.另设计l对连接引物,利用PCR方法将tPA信号肽与已删除自身信号肽的ORF5基因相连,成功构建了用tPA信号肽取代猪繁殖与呼吸综合征病毒ORF5基因原有信号肽的原核表达质粒,为下一步GP5蛋白分泌表达及猪繁殖与呼吸综合征疫苗开发、诊断试剂盒的研制与应用奠定基础.
根據GenBank(序列號E00896)上公佈的人組織型纖溶酶原激活因子(tissue plasminogen activator,tPA)的序列,利用在線信號肽分析工具Signal P3.0 Server預測齣人tPA的信號肽共有63 bp,設計1對能互為模闆直接進行擴增的特異性引物.通過重疊PCR的方法擴增齣tPA信號肽.另設計l對連接引物,利用PCR方法將tPA信號肽與已刪除自身信號肽的ORF5基因相連,成功構建瞭用tPA信號肽取代豬繁殖與呼吸綜閤徵病毒ORF5基因原有信號肽的原覈錶達質粒,為下一步GP5蛋白分泌錶達及豬繁殖與呼吸綜閤徵疫苗開髮、診斷試劑盒的研製與應用奠定基礎.
근거GenBank(서렬호E00896)상공포적인조직형섬용매원격활인자(tissue plasminogen activator,tPA)적서렬,이용재선신호태분석공구Signal P3.0 Server예측출인tPA적신호태공유63 bp,설계1대능호위모판직접진행확증적특이성인물.통과중첩PCR적방법확증출tPA신호태.령설계l대련접인물,이용PCR방법장tPA신호태여이산제자신신호태적ORF5기인상련,성공구건료용tPA신호태취대저번식여호흡종합정병독ORF5기인원유신호태적원핵표체질립,위하일보GP5단백분비표체급저번식여호흡종합정역묘개발、진단시제합적연제여응용전정기출.
