工业微生物
工業微生物
공업미생물
INDUSTRIAL MICROBIOLOGY
2010年
4期
29-33
,共5页
易国辉%屠发志%张爱联%张添元%屈直%罗进贤
易國輝%屠髮誌%張愛聯%張添元%屈直%囉進賢
역국휘%도발지%장애련%장첨원%굴직%라진현
纤维素二糖水解酶%毕赤酵母%基因表达%酶活力
纖維素二糖水解酶%畢赤酵母%基因錶達%酶活力
섬유소이당수해매%필적효모%기인표체%매활력
用套叠PCR法扩增木霉的cbhⅡ基因,以EcoR I和Not I双酶切将其克隆进P. pastoris表达载体pGAP9K,获得重组表达质粒pGAP-cbhⅡ.通过电转法将其cbhⅡ基因重组于P. pastoris基因组,筛选高G418抗性的克隆作为工程菌.用葡萄糖作为碳源摇瓶发酵3 d,分泌的重组蛋白CBHⅡ达到50 mg/L.用CMC酶活法测定发酵液中的CMC酶活力为2.05 U/mL.
用套疊PCR法擴增木黴的cbhⅡ基因,以EcoR I和Not I雙酶切將其剋隆進P. pastoris錶達載體pGAP9K,穫得重組錶達質粒pGAP-cbhⅡ.通過電轉法將其cbhⅡ基因重組于P. pastoris基因組,篩選高G418抗性的剋隆作為工程菌.用葡萄糖作為碳源搖瓶髮酵3 d,分泌的重組蛋白CBHⅡ達到50 mg/L.用CMC酶活法測定髮酵液中的CMC酶活力為2.05 U/mL.
용투첩PCR법확증목매적cbhⅡ기인,이EcoR I화Not I쌍매절장기극륭진P. pastoris표체재체pGAP9K,획득중조표체질립pGAP-cbhⅡ.통과전전법장기cbhⅡ기인중조우P. pastoris기인조,사선고G418항성적극륭작위공정균.용포도당작위탄원요병발효3 d,분비적중조단백CBHⅡ체도50 mg/L.용CMC매활법측정발효액중적CMC매활력위2.05 U/mL.
