畜牧兽医学报
畜牧獸醫學報
축목수의학보
2012年
2期
211-219
,共9页
李秀%徐琪%张扬%毕瑜林%赵荣雪%陈昌义%段修军%陈国宏
李秀%徐琪%張颺%畢瑜林%趙榮雪%陳昌義%段脩軍%陳國宏
리수%서기%장양%필유림%조영설%진창의%단수군%진국굉
雏鸭%雏鸭肝炎病毒%抑制性消减杂交%表达序列标签
雛鴨%雛鴨肝炎病毒%抑製性消減雜交%錶達序列標籤
추압%추압간염병독%억제성소감잡교%표체서렬표첨
本研究通过构建雏鸭肝脏消减cDNA文库,旨在筛选并鉴定与雏鸭病毒性肝炎相关的基因,对相关基因进行功能聚类分析进而探究其作用机理.利用抑制性消减杂交(Suppression subtraction hybridization,SSH)技术构建3日龄健康全同胞金定鸭人工感染雏鸭肝炎病毒(Duck hepatitis virus,DHV)与同期注射等量生理盐水差异表达基因的SSH-cDNA文库.对其中563个阳性克隆进行测序,共获得299条差异表达序列标签(Expressedsequence tags,ESTs).去除冗余的cDNA序列载体并聚类拼接后,进行核酸和蛋白质同源性的比较和功能聚类分析.结果表明:有70个不同的基因与ESTs具有高度的同源性(E值＜e-10,匹配长度＞150 bp,匹配度＞80％),且多数基因与细胞组分合成、信号转导以及病理状态下的生物学调控过程相关.Ⅰ型雏鸭病毒性肝炎的发生和发展是多基因多步骤的复杂过程,该结果为深入研究雏鸭肝炎病的分子调控机制提供基础.
本研究通過構建雛鴨肝髒消減cDNA文庫,旨在篩選併鑒定與雛鴨病毒性肝炎相關的基因,對相關基因進行功能聚類分析進而探究其作用機理.利用抑製性消減雜交(Suppression subtraction hybridization,SSH)技術構建3日齡健康全同胞金定鴨人工感染雛鴨肝炎病毒(Duck hepatitis virus,DHV)與同期註射等量生理鹽水差異錶達基因的SSH-cDNA文庫.對其中563箇暘性剋隆進行測序,共穫得299條差異錶達序列標籤(Expressedsequence tags,ESTs).去除冗餘的cDNA序列載體併聚類拼接後,進行覈痠和蛋白質同源性的比較和功能聚類分析.結果錶明:有70箇不同的基因與ESTs具有高度的同源性(E值＜e-10,匹配長度＞150 bp,匹配度＞80％),且多數基因與細胞組分閤成、信號轉導以及病理狀態下的生物學調控過程相關.Ⅰ型雛鴨病毒性肝炎的髮生和髮展是多基因多步驟的複雜過程,該結果為深入研究雛鴨肝炎病的分子調控機製提供基礎.
본연구통과구건추압간장소감cDNA문고,지재사선병감정여추압병독성간염상관적기인,대상관기인진행공능취류분석진이탐구기작용궤리.이용억제성소감잡교(Suppression subtraction hybridization,SSH)기술구건3일령건강전동포금정압인공감염추압간염병독(Duck hepatitis virus,DHV)여동기주사등량생리염수차이표체기인적SSH-cDNA문고.대기중563개양성극륭진행측서,공획득299조차이표체서렬표첨(Expressedsequence tags,ESTs).거제용여적cDNA서렬재체병취류병접후,진행핵산화단백질동원성적비교화공능취류분석.결과표명:유70개불동적기인여ESTs구유고도적동원성(E치＜e-10,필배장도＞150 bp,필배도＞80％),차다수기인여세포조분합성、신호전도이급병리상태하적생물학조공과정상관.Ⅰ형추압병독성간염적발생화발전시다기인다보취적복잡과정,해결과위심입연구추압간염병적분자조공궤제제공기출.
