中国病理生理杂志
中國病理生理雜誌
중국병리생리잡지
CHINESE JOURNAL OF PATHOPHYSIOLOGY
2012年
8期
1424-1430
,共7页
余勤%林洁%刘丽珍%王艳%宣晓波%王标%单威%周丽萍%刘伟
餘勤%林潔%劉麗珍%王豔%宣曉波%王標%單威%週麗萍%劉偉
여근%림길%류려진%왕염%선효파%왕표%단위%주려평%류위
间充质干细胞%细胞分化%基质细胞衍生因子-1α%CXC趋化因子受体4
間充質榦細胞%細胞分化%基質細胞衍生因子-1α%CXC趨化因子受體4
간충질간세포%세포분화%기질세포연생인자-1α%CXC추화인자수체4
目的:探讨基质细胞衍生因子-1(stromal cell-derived factor-1,SDF-1)/ CXC趋化因子受体4(CXC chemokine receptor 4,CXCR4)轴调控间充质干细胞定向分化、修复缺氧缺血性脑损伤的作用.方法:大鼠间充质干细胞(rat mesenchymal stem cells,rMSCs)经缺氧培养不同时点(0 h、6 h、12 h、24 h、48 h、72 h)或SDF-1α(10 μg/L)孵育后,采用RT-PCR、Western blotting和流式细胞术检测其表面CXCR4表达的变化;建立大鼠缺氧缺血性脑损伤模型,运用RT-PCR和Western blotting检测造模后不同时点(1 d、3 d、5 d、7 d、14 d、21 d)大鼠脑部海马组织中SDF-1α mRNA转录和蛋白表达的改变情况;用AMD3100(CXCR4拮抗剂)拮抗rMSCs 表面CXCR4后,免疫细胞化学和Western blotting检测rMSCs诱导向神经细胞分化中神经元特异性烯醇化酶(neuron-specific enolase,NSE)和胶质纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP)等神经细胞特异性标志物的阳性率及表达变化情况.结果:低氧培养6 h及12 h的 rMSCs CXCR4 mRNA及蛋白表达水平均较常氧培养组明显增加(P<0.01),10 μg/L SDF-1α孵育后rMSCs 的CXCR4表达水平明显增加(P<0.01);缺氧缺血性脑损伤模型的大鼠脑内SDF-1α蛋白表达显著增加(P<0.01); 5 mg/L AMD3100处理后的rMSCs在向神经细胞诱导分化中NSE和GFAP蛋白的表达明显减少.结论:微小剂量的SDF-1α可诱导低氧培养的rMSCs表面CXCR4的表达,而在缺氧缺血性脑损伤模型的大鼠脑内SDF-1α表达增加,从而使SDF-1/CXCR4轴的生物学效应得以增强;CXCR4拮抗的rMSCs在分化中神经细胞特异性标志物NSE和GFAP的表达降低,表明SDF-1/CXCR4轴在rMSCs定向神经分化修复缺血缺氧脑损伤中具有重要的调控作用.
目的:探討基質細胞衍生因子-1(stromal cell-derived factor-1,SDF-1)/ CXC趨化因子受體4(CXC chemokine receptor 4,CXCR4)軸調控間充質榦細胞定嚮分化、脩複缺氧缺血性腦損傷的作用.方法:大鼠間充質榦細胞(rat mesenchymal stem cells,rMSCs)經缺氧培養不同時點(0 h、6 h、12 h、24 h、48 h、72 h)或SDF-1α(10 μg/L)孵育後,採用RT-PCR、Western blotting和流式細胞術檢測其錶麵CXCR4錶達的變化;建立大鼠缺氧缺血性腦損傷模型,運用RT-PCR和Western blotting檢測造模後不同時點(1 d、3 d、5 d、7 d、14 d、21 d)大鼠腦部海馬組織中SDF-1α mRNA轉錄和蛋白錶達的改變情況;用AMD3100(CXCR4拮抗劑)拮抗rMSCs 錶麵CXCR4後,免疫細胞化學和Western blotting檢測rMSCs誘導嚮神經細胞分化中神經元特異性烯醇化酶(neuron-specific enolase,NSE)和膠質纖維痠性蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP)等神經細胞特異性標誌物的暘性率及錶達變化情況.結果:低氧培養6 h及12 h的 rMSCs CXCR4 mRNA及蛋白錶達水平均較常氧培養組明顯增加(P<0.01),10 μg/L SDF-1α孵育後rMSCs 的CXCR4錶達水平明顯增加(P<0.01);缺氧缺血性腦損傷模型的大鼠腦內SDF-1α蛋白錶達顯著增加(P<0.01); 5 mg/L AMD3100處理後的rMSCs在嚮神經細胞誘導分化中NSE和GFAP蛋白的錶達明顯減少.結論:微小劑量的SDF-1α可誘導低氧培養的rMSCs錶麵CXCR4的錶達,而在缺氧缺血性腦損傷模型的大鼠腦內SDF-1α錶達增加,從而使SDF-1/CXCR4軸的生物學效應得以增彊;CXCR4拮抗的rMSCs在分化中神經細胞特異性標誌物NSE和GFAP的錶達降低,錶明SDF-1/CXCR4軸在rMSCs定嚮神經分化脩複缺血缺氧腦損傷中具有重要的調控作用.
목적:탐토기질세포연생인자-1(stromal cell-derived factor-1,SDF-1)/ CXC추화인자수체4(CXC chemokine receptor 4,CXCR4)축조공간충질간세포정향분화、수복결양결혈성뇌손상적작용.방법:대서간충질간세포(rat mesenchymal stem cells,rMSCs)경결양배양불동시점(0 h、6 h、12 h、24 h、48 h、72 h)혹SDF-1α(10 μg/L)부육후,채용RT-PCR、Western blotting화류식세포술검측기표면CXCR4표체적변화;건립대서결양결혈성뇌손상모형,운용RT-PCR화Western blotting검측조모후불동시점(1 d、3 d、5 d、7 d、14 d、21 d)대서뇌부해마조직중SDF-1α mRNA전록화단백표체적개변정황;용AMD3100(CXCR4길항제)길항rMSCs 표면CXCR4후,면역세포화학화Western blotting검측rMSCs유도향신경세포분화중신경원특이성희순화매(neuron-specific enolase,NSE)화효질섬유산성단백(glial fibrillary acidic protein,GFAP)등신경세포특이성표지물적양성솔급표체변화정황.결과:저양배양6 h급12 h적 rMSCs CXCR4 mRNA급단백표체수평균교상양배양조명현증가(P<0.01),10 μg/L SDF-1α부육후rMSCs 적CXCR4표체수평명현증가(P<0.01);결양결혈성뇌손상모형적대서뇌내SDF-1α단백표체현저증가(P<0.01); 5 mg/L AMD3100처리후적rMSCs재향신경세포유도분화중NSE화GFAP단백적표체명현감소.결론:미소제량적SDF-1α가유도저양배양적rMSCs표면CXCR4적표체,이재결양결혈성뇌손상모형적대서뇌내SDF-1α표체증가,종이사SDF-1/CXCR4축적생물학효응득이증강;CXCR4길항적rMSCs재분화중신경세포특이성표지물NSE화GFAP적표체강저,표명SDF-1/CXCR4축재rMSCs정향신경분화수복결혈결양뇌손상중구유중요적조공작용.
