CAJ | 학술논문

目的:检测QY1骨髓间质干细胞系在体外向脂肪细胞、软骨细胞、成骨细胞、心肌细胞、血管内皮细胞和神经细胞分化的能力.方法:选用第5代QY1骨髓间质干细胞系,分别用成脂培养基、成软骨培养基、成骨培养基、5–氮胞苷、血管内皮生长因子、神经细胞培养液(诱导液1为10mmol/L β-巯基乙醇;诱导液2为2%二甲基亚砜和10-8mol/L地塞米松)对其进行定向诱导分化.采用染色法、免疫组化法、RT-PCR法鉴定分化后的细胞.结果:在成脂培养基培养21d左右出现大量含脂滴的脂肪细胞,苏丹III染色法检测脂肪细胞胞浆呈桔红色.在成软骨培养基培养21d左右有软骨结节形成,阿尔新蓝染色法将软骨结节染为深蓝色.在成骨培养基培养35d左右有凸出的骨结节形成,Von Kossa染色法显示有黑色矿化结节形成.在10μmol/L 5–氮胞苷诱导液中能出现自发性搏动的心肌细胞和肌管样结构,免疫组化法显示心肌特异性的表面抗体α-横纹肌肌动蛋白、心肌连接蛋白-43表达阳性,RT-PCR法检测有心肌特异性因子α-肌球蛋白重链表达.在含有50ng/mL血管内皮生长因子的诱导液中能出现呈直线排列的血管内皮细胞和血管内皮细胞网状结构,免疫组化法显示血管内皮特异性表面抗体CD31和VIII因子表达阳性.神经诱导液1处理组出现神经元,免疫组化法显示胶质纤维酸性蛋白表达阴性,神经元特异性核蛋白表达阳性;神经诱导液2处理组出现神经胶质细胞,免疫组化法显示胶质纤维酸性蛋白表达阳性,神经元特异性核蛋白表达阴性.结论:本研究证实QY1骨髓间质干细胞系细胞具有分化为脂肪细胞、软骨细胞、成骨细胞、心肌细胞、血管内皮细胞、神经元和神经胶质细胞的潜能,提示QY1骨髓间质干细胞系具有向多个胚层、7个方向分化的多向潜能.
목적:검측QY1골수간질간세포계재체외향지방세포、연골세포、성골세포、심기세포、혈관내피세포화신경세포분화적능력.방법:선용제5대QY1골수간질간세포계,분별용성지배양기、성연골배양기、성골배양기、5–담포감、혈관내피생장인자、신경세포배양액(유도액1위10mmol/L β-구기을순;유도액2위2%이갑기아풍화10-8mol/L지새미송)대기진행정향유도분화.채용염색법、면역조화법、RT-PCR법감정분화후적세포.결과:재성지배양기배양21d좌우출현대량함지적적지방세포,소단III염색법검측지방세포포장정길홍색.재성연골배양기배양21d좌우유연골결절형성,아이신람염색법장연골결절염위심람색.재성골배양기배양35d좌우유철출적골결절형성,Von Kossa염색법현시유흑색광화결절형성.재10μmol/L 5–담포감유도액중능출현자발성박동적심기세포화기관양결구,면역조화법현시심기특이성적표면항체α-횡문기기동단백、심기련접단백-43표체양성,RT-PCR법검측유심기특이성인자α-기구단백중련표체.재함유50ng/mL혈관내피생장인자적유도액중능출현정직선배렬적혈관내피세포화혈관내피세포망상결구,면역조화법현시혈관내피특이성표면항체CD31화VIII인자표체양성.신경유도액1처리조출현신경원,면역조화법현시효질섬유산성단백표체음성,신경원특이성핵단백표체양성;신경유도액2처리조출현신경효질세포,면역조화법현시효질섬유산성단백표체양성,신경원특이성핵단백표체음성.결론:본연구증실QY1골수간질간세포계세포구유분화위지방세포、연골세포、성골세포、심기세포、혈관내피세포、신경원화신경효질세포적잠능,제시QY1골수간질간세포계구유향다개배층、7개방향분화적다향잠능.