应用与环境生物学报
應用與環境生物學報
응용여배경생물학보
CHINESE JOURNAL OF APPLIED & ENVIRONMENTAL BIOLOGY
2007年
3期
341-344
,共4页
尉研%喻麟%崔佳%杨土凤%刘燕飞%刘世贵%龙章富
尉研%喻麟%崔佳%楊土鳳%劉燕飛%劉世貴%龍章富
위연%유린%최가%양토봉%류연비%류세귀%룡장부
牛蛙生长激素基因%真核表达质粒%转染%COS7细胞
牛蛙生長激素基因%真覈錶達質粒%轉染%COS7細胞
우와생장격소기인%진핵표체질립%전염%COS7세포
应用RT-PCR技术克隆牛蛙生长激素(BfGH)的cDNA,T-A克隆法构建反向插入的pMD18-T/BfGH重组质粒,回收BamHⅠ酶切的BfGH cDNA片段,并与去磷酸化处理的真核表达载体VR1020/BamHⅠ,酶切鉴定方法筛选BfGH正向插入的重组真核表达质粒VBfGH.脂质体法介导质粒VBfGH转染哺乳动物细胞COS7,对转染后的COS7细胞进行RT-PCR、ELISA和免疫荧光检测,分别在转录和翻译水平证实BfGH基因在COS7细胞中得到了正确的转染表达.
應用RT-PCR技術剋隆牛蛙生長激素(BfGH)的cDNA,T-A剋隆法構建反嚮插入的pMD18-T/BfGH重組質粒,迴收BamHⅠ酶切的BfGH cDNA片段,併與去燐痠化處理的真覈錶達載體VR1020/BamHⅠ,酶切鑒定方法篩選BfGH正嚮插入的重組真覈錶達質粒VBfGH.脂質體法介導質粒VBfGH轉染哺乳動物細胞COS7,對轉染後的COS7細胞進行RT-PCR、ELISA和免疫熒光檢測,分彆在轉錄和翻譯水平證實BfGH基因在COS7細胞中得到瞭正確的轉染錶達.
응용RT-PCR기술극륭우와생장격소(BfGH)적cDNA,T-A극륭법구건반향삽입적pMD18-T/BfGH중조질립,회수BamHⅠ매절적BfGH cDNA편단,병여거린산화처리적진핵표체재체VR1020/BamHⅠ,매절감정방법사선BfGH정향삽입적중조진핵표체질립VBfGH.지질체법개도질립VBfGH전염포유동물세포COS7,대전염후적COS7세포진행RT-PCR、ELISA화면역형광검측,분별재전록화번역수평증실BfGH기인재COS7세포중득도료정학적전염표체.
