西北大学学报(自然科学版)
西北大學學報(自然科學版)
서북대학학보(자연과학판)
JOURNAL OF NORTHWEST UNIVERSITY(NATURAL SCIENCE EDITION)
2007年
4期
617-620
,共4页
王袆玲%潘豪杰%沈张波%赵桂仿
王袆玲%潘豪傑%瀋張波%趙桂倣
왕위령%반호걸%침장파%조계방
七筋菇%DNA提取%模板浓度
七觔菇%DNA提取%模闆濃度
칠근고%DNA제취%모판농도
目的 对七筋菇基因组DNA提取和ISSR-PCR扩增模板浓度进行优化.方法 以常规的CTAB法为基础,对七筋菇基因组DNA提取进行了优化:提取液中加入PVP(6%(w/v)),β-巯基乙醇的浓度提高至5%(w/v);第一次抽提后,重新加入提取液及抗坏血酸(20%(w/v)),65%水浴30min.结果 所提样品DNA,A260/280,A260/230的平均光吸收值分别为1.78,1.99,浓度为105ng/μL左右,ISSR扩增带多且清晰明亮,稳定性及多态性高,表明DNA纯度高;对扩增反应的最佳模板浓度进行研究表明,所提DNA模板稀释2倍效果最好(浓度为50ng/μL).结论 改良后的CTAB法适于提取七筋菇植物的基因组DNA.
目的 對七觔菇基因組DNA提取和ISSR-PCR擴增模闆濃度進行優化.方法 以常規的CTAB法為基礎,對七觔菇基因組DNA提取進行瞭優化:提取液中加入PVP(6%(w/v)),β-巰基乙醇的濃度提高至5%(w/v);第一次抽提後,重新加入提取液及抗壞血痠(20%(w/v)),65%水浴30min.結果 所提樣品DNA,A260/280,A260/230的平均光吸收值分彆為1.78,1.99,濃度為105ng/μL左右,ISSR擴增帶多且清晰明亮,穩定性及多態性高,錶明DNA純度高;對擴增反應的最佳模闆濃度進行研究錶明,所提DNA模闆稀釋2倍效果最好(濃度為50ng/μL).結論 改良後的CTAB法適于提取七觔菇植物的基因組DNA.
목적 대칠근고기인조DNA제취화ISSR-PCR확증모판농도진행우화.방법 이상규적CTAB법위기출,대칠근고기인조DNA제취진행료우화:제취액중가입PVP(6%(w/v)),β-구기을순적농도제고지5%(w/v);제일차추제후,중신가입제취액급항배혈산(20%(w/v)),65%수욕30min.결과 소제양품DNA,A260/280,A260/230적평균광흡수치분별위1.78,1.99,농도위105ng/μL좌우,ISSR확증대다차청석명량,은정성급다태성고,표명DNA순도고;대확증반응적최가모판농도진행연구표명,소제DNA모판희석2배효과최호(농도위50ng/μL).결론 개량후적CTAB법괄우제취칠근고식물적기인조DNA.