大鼠附睾脂肪垫脂肪源性干细胞的分离培养及分化潜能
대서부고지방점지방원성간세포적분리배양급분화잠능
Isolation, culture and differentiational potential of adipose-derived stem cells from rat epididymal fat pads
  • 万方数据
    中国组织工程研究与临床康复 중국조직공정연구여림상강복
    JOURNAL OF CLINICAL REHABILITATIVE TISSUE ENGINEERING RESEARCH
    2009年 14期 2685-2690 ,共6页

    张丽华%汤银娟%刘杰明%杨林%董为人%郭家松%王海红%戴翔%宋建武%陈英华%肖应庆

    장려화%탕은연%류걸명%양림%동위인%곽가송%왕해홍%대상%송건무%진영화%초응경

    脂肪源性干细胞%培养%诱导%免疫细胞化学 脂肪源性榦細胞%培養%誘導%免疫細胞化學
    지방원성간세포%배양%유도%면역세포화학
    背景:相对于骨髓基质干细胞,脂肪源性下细胞来源丰富,取材方便,干细胞丰度高,极易培养,具有多向分化潜能,有望成为组织工程、细胞治疗以及基因转染良好的源细胞,但目前对脂肪源性干细胞的研究尚处于初级阶段.目的:拟在体外分离培养大鼠脂肪源性干细胞,并探讨其分化潜能.设计、时间及地点:细胞学体外观察,于2008-06/2009-01在南方医科大学组胚教研室和南方医院临床医学实验中心完成.材料:SPF级成年雄性SD大鼠1只,由南方医科大学实验动物中心提供.方法:无菌条件下切取大鼠双侧附睾尾脂肪垫,胶原酶消化法分离培养脂肪源性干细胞,胰蛋白酶消化法传代扩增.取第4代脂肪源性干细胞接种到96孔板,5×104个细胞/皿,待细胞贴壁后分成3组:成骨诱导组加入成骨培养基,成脂诱导组加入成脂培养基,对照组仍用基础培养基,培养14 d.主要观察指标:脂肪源性干细胞的形态变化、体外增殖能力、细胞免疫化学鉴定结果.脂肪源性干细胞成骨和成脂分化能力.结果:体外培养的脂肪源性干细胞易扩增,传代后以长梭形细胞为主,呈旋涡状排列,克隆样生长;经多次传代仍能保持较强的增殖能力,细胞生长曲线争"S"形;细胞表面标志CD44和CD49d呈阳性表达,CDl06呈阴性表达.脂肪源性干细胞经成骨诱导7 d后,碱性磷酸酶染色呈阳性;成脂诱导3 d后,油红O染色示胞浆内有脂滴出现;对照组细胞碱性磷酸酶染色呈阴性,无脂滴存在.结论:从大鼠附睾脂肪垫内分离的脂肪源性干细胞易于培养和传代扩增,在特殊条件下可分化为成骨细胞和脂肪细胞.
    배경:상대우골수기질간세포,지방원성하세포래원봉부,취재방편,간세포봉도고,겁역배양,구유다향분화잠능,유망성위조직공정、세포치료이급기인전염량호적원세포,단목전대지방원성간세포적연구상처우초급계단.목적:의재체외분리배양대서지방원성간세포,병탐토기분화잠능.설계、시간급지점:세포학체외관찰,우2008-06/2009-01재남방의과대학조배교연실화남방의원림상의학실험중심완성.재료:SPF급성년웅성SD대서1지,유남방의과대학실험동물중심제공.방법:무균조건하절취대서쌍측부고미지방점,효원매소화법분리배양지방원성간세포,이단백매소화법전대확증.취제4대지방원성간세포접충도96공판,5×104개세포/명,대세포첩벽후분성3조:성골유도조가입성골배양기,성지유도조가입성지배양기,대조조잉용기출배양기,배양14 d.주요관찰지표:지방원성간세포적형태변화、체외증식능력、세포면역화학감정결과.지방원성간세포성골화성지분화능력.결과:체외배양적지방원성간세포역확증,전대후이장사형세포위주,정선와상배렬,극륭양생장;경다차전대잉능보지교강적증식능력,세포생장곡선쟁"S"형;세포표면표지CD44화CD49d정양성표체,CDl06정음성표체.지방원성간세포경성골유도7 d후,감성린산매염색정양성;성지유도3 d후,유홍O염색시포장내유지적출현;대조조세포감성린산매염색정음성,무지적존재.결론:종대서부고지방점내분리적지방원성간세포역우배양화전대확증,재특수조건하가분화위성골세포화지방세포.
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