孝感学院学报
孝感學院學報
효감학원학보
JOURNAL OF XIAOGAN UNIVERSITY
2009年
3期
10-14
,共5页
李长春%王志华%乔富兴%熊燃
李長春%王誌華%喬富興%熊燃
리장춘%왕지화%교부흥%웅연
海甘蓝%硫甙%thiohydroximate S-glucosyltransferase%外显子拼接%表达载体构建
海甘藍%硫甙%thiohydroximate S-glucosyltransferase%外顯子拼接%錶達載體構建
해감람%류대%thiohydroximate S-glucosyltransferase%외현자병접%표체재체구건
Thiohydroximate S-glucosyltransferase(S-GT)是硫甙生物合成的一个关键酶.根据发表的甘蓝型油菜S-GT基因cDNA序列设计引物,以海甘蓝总DNA为模板进行PCR扩增,获得S-GT基因全长,构建了海甘蓝S-GT基因的植物双元表达载体pCambia2300sn-CaSGT.用PCR的方法对CaSGT基因的外显子进行了拼接,将得到的序列正向插入到了大肠杆菌表达载体pET-32b(+)中,得到重组质粒pET·32b(+)-CaS-GT,为进一步研究CaSGT的生物学特性打下基础.
Thiohydroximate S-glucosyltransferase(S-GT)是硫甙生物閤成的一箇關鍵酶.根據髮錶的甘藍型油菜S-GT基因cDNA序列設計引物,以海甘藍總DNA為模闆進行PCR擴增,穫得S-GT基因全長,構建瞭海甘藍S-GT基因的植物雙元錶達載體pCambia2300sn-CaSGT.用PCR的方法對CaSGT基因的外顯子進行瞭拼接,將得到的序列正嚮插入到瞭大腸桿菌錶達載體pET-32b(+)中,得到重組質粒pET·32b(+)-CaS-GT,為進一步研究CaSGT的生物學特性打下基礎.
Thiohydroximate S-glucosyltransferase(S-GT)시류대생물합성적일개관건매.근거발표적감람형유채S-GT기인cDNA서렬설계인물,이해감람총DNA위모판진행PCR확증,획득S-GT기인전장,구건료해감람S-GT기인적식물쌍원표체재체pCambia2300sn-CaSGT.용PCR적방법대CaSGT기인적외현자진행료병접,장득도적서렬정향삽입도료대장간균표체재체pET-32b(+)중,득도중조질립pET·32b(+)-CaS-GT,위진일보연구CaSGT적생물학특성타하기출.