台湾海峡
檯灣海峽
태만해협
JOURNAL OF OCEANOGRAPHY IN TAIWAN STRAIT
2010年
2期
184-188
,共5页
海洋生物学%对虾白斑综合症病毒%极早期基因%启动子%筛选文库%增强型绿色荧光蛋白
海洋生物學%對蝦白斑綜閤癥病毒%極早期基因%啟動子%篩選文庫%增彊型綠色熒光蛋白
해양생물학%대하백반종합증병독%겁조기기인%계동자%사선문고%증강형록색형광단백
对虾白斑综合症病毒(white spot syndrome virus, WSSV)是危害对虾养殖业的主要病原,而WSSV极早期基因对病毒功能基因的转录翻译和调控起着至关重要的作用.本研究将WSSV基因组以超声法随机断裂至400～900bp DNA片段,并插入启动子缺失且多克隆位点下游具有报告基因的载体来构建文库,转染昆虫细胞Hi5.倒置荧光显微镜观察发现部分转染后的细胞有增强型绿色荧光蛋白(EGFP)的表达,表明这部分细胞中的DNA片段可能具有极早期启动子活性.流式细胞仪分析显示,这部分荧光细胞占总细胞的比例为0.35%.由于转染效率为50%,可认为占比0.7%的WSSV基因组随机片段能在Hi5细胞中激发下游报告基因的转录翻译,可能具有极早期基因启动子活性.这对于进一步筛选和鉴定WSSV极早期基因及开展极早期启动子研究具有重要的意义.
對蝦白斑綜閤癥病毒(white spot syndrome virus, WSSV)是危害對蝦養殖業的主要病原,而WSSV極早期基因對病毒功能基因的轉錄翻譯和調控起著至關重要的作用.本研究將WSSV基因組以超聲法隨機斷裂至400～900bp DNA片段,併插入啟動子缺失且多剋隆位點下遊具有報告基因的載體來構建文庫,轉染昆蟲細胞Hi5.倒置熒光顯微鏡觀察髮現部分轉染後的細胞有增彊型綠色熒光蛋白(EGFP)的錶達,錶明這部分細胞中的DNA片段可能具有極早期啟動子活性.流式細胞儀分析顯示,這部分熒光細胞佔總細胞的比例為0.35%.由于轉染效率為50%,可認為佔比0.7%的WSSV基因組隨機片段能在Hi5細胞中激髮下遊報告基因的轉錄翻譯,可能具有極早期基因啟動子活性.這對于進一步篩選和鑒定WSSV極早期基因及開展極早期啟動子研究具有重要的意義.
대하백반종합증병독(white spot syndrome virus, WSSV)시위해대하양식업적주요병원,이WSSV겁조기기인대병독공능기인적전록번역화조공기착지관중요적작용.본연구장WSSV기인조이초성법수궤단렬지400～900bp DNA편단,병삽입계동자결실차다극륭위점하유구유보고기인적재체래구건문고,전염곤충세포Hi5.도치형광현미경관찰발현부분전염후적세포유증강형록색형광단백(EGFP)적표체,표명저부분세포중적DNA편단가능구유겁조기계동자활성.류식세포의분석현시,저부분형광세포점총세포적비례위0.35%.유우전염효솔위50%,가인위점비0.7%적WSSV기인조수궤편단능재Hi5세포중격발하유보고기인적전록번역,가능구유겁조기기인계동자활성.저대우진일보사선화감정WSSV겁조기기인급개전겁조기계동자연구구유중요적의의.
