CAJ | 학술논문

目的克隆与结核分支杆菌耐异烟肼密切相关的KatG基因，实现其在大肠杆菌中的表达并对其酶活性进行初步检测。方法构建含KatG基因的表达质粒pET24b-KatG，转化大肠杆菌BL21(DE3)菌株，获得稳定的高表达菌株后对表达产物进行过氧化氢酶活性的初步检测。结果限制性内切酶分析结果显示所构建的pET24b-KatG表达质粒已成功克隆了KatG基因。含pET24b-KatG表达质粒的大肠杆菌在导丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)诱导下表达，对表达产物进行SDS-PAGE，发现KatG表达产物相对分子质量约为80×103，表达产物约占总蛋白量的17.7%。表达产物检测具有过氧化氢酶活性。结论克隆并在工程菌中表达了异烟肼耐药密切相关的KatG基因，表达产物具备过氧化氢酶活性。可藉此方法研究结核分支杆菌的耐药机制。
목적극륭여결핵분지간균내이연정밀절상관적KatG기인，실현기재대장간균중적표체병대기매활성진행초보검측。방법구건함KatG기인적표체질립pET24b-KatG，전화대장간균BL21(DE3)균주，획득은정적고표체균주후대표체산물진행과양화경매활성적초보검측。결과한제성내절매분석결과현시소구건적pET24b-KatG표체질립이성공극륭료KatG기인。함pET24b-KatG표체질립적대장간균재도병기류대-β-D-반유당감(IPTG)유도하표체，대표체산물진행SDS-PAGE，발현KatG표체산물상대분자질량약위80×103，표체산물약점총단백량적17.7%。표체산물검측구유과양화경매활성。결론극륭병재공정균중표체료이연정내약밀절상관적KatG기인，표체산물구비과양화경매활성。가자차방법연구결핵분지간균적내약궤제。