细胞与分子免疫学杂志
細胞與分子免疫學雜誌
세포여분자면역학잡지
2005年
1期
43-45,49
,共4页
吕明%赖春宁%于鸣%郭宁%黎燕%沈倍奋
呂明%賴春寧%于鳴%郭寧%黎燕%瀋倍奮
려명%뢰춘저%우명%곽저%려연%침배강
CD3%嵌合抗体%混合淋巴细胞培养%免疫抑制
CD3%嵌閤抗體%混閤淋巴細胞培養%免疫抑製
CD3%감합항체%혼합림파세포배양%면역억제
目的: 构建并表达抗人CD3嵌合抗体, 以克服鼠源单克隆抗体(mAb)用于临床的局限性.方法: 采用基因工程技术, 将抗体VL、 VH基因分别克隆入嵌合抗体表达载体VL Express及VH Express中.共转染COS-7细胞后, 用ELISA检测培养上清中嵌合抗体的表达水平; 采用Protein A亲和层析法纯化抗体, 并进行Western blot鉴定.用FACS检测嵌合抗体结合抗原的活性; 混合淋巴细胞培养检测抗体的功能.结果: 成功地构建了VH Express-VH及VL Express-VL表达载体并表达纯化. Western blot的结果显示, 表达的抗人CD3抗体为人鼠嵌合抗体. FACS的结果显示, 该抗体具有良好的结合抗原活性; 混合淋巴细胞培养结果显示, 该抗体具有一定的免疫抑制功能.结论: 成功地构建、表达了抗人CD3嵌合抗体, 为进一步的研究打下了基础.
目的: 構建併錶達抗人CD3嵌閤抗體, 以剋服鼠源單剋隆抗體(mAb)用于臨床的跼限性.方法: 採用基因工程技術, 將抗體VL、 VH基因分彆剋隆入嵌閤抗體錶達載體VL Express及VH Express中.共轉染COS-7細胞後, 用ELISA檢測培養上清中嵌閤抗體的錶達水平; 採用Protein A親和層析法純化抗體, 併進行Western blot鑒定.用FACS檢測嵌閤抗體結閤抗原的活性; 混閤淋巴細胞培養檢測抗體的功能.結果: 成功地構建瞭VH Express-VH及VL Express-VL錶達載體併錶達純化. Western blot的結果顯示, 錶達的抗人CD3抗體為人鼠嵌閤抗體. FACS的結果顯示, 該抗體具有良好的結閤抗原活性; 混閤淋巴細胞培養結果顯示, 該抗體具有一定的免疫抑製功能.結論: 成功地構建、錶達瞭抗人CD3嵌閤抗體, 為進一步的研究打下瞭基礎.
목적: 구건병표체항인CD3감합항체, 이극복서원단극륭항체(mAb)용우림상적국한성.방법: 채용기인공정기술, 장항체VL、 VH기인분별극륭입감합항체표체재체VL Express급VH Express중.공전염COS-7세포후, 용ELISA검측배양상청중감합항체적표체수평; 채용Protein A친화층석법순화항체, 병진행Western blot감정.용FACS검측감합항체결합항원적활성; 혼합림파세포배양검측항체적공능.결과: 성공지구건료VH Express-VH급VL Express-VL표체재체병표체순화. Western blot적결과현시, 표체적항인CD3항체위인서감합항체. FACS적결과현시, 해항체구유량호적결합항원활성; 혼합림파세포배양결과현시, 해항체구유일정적면역억제공능.결론: 성공지구건、표체료항인CD3감합항체, 위진일보적연구타하료기출.
