毒理学杂志
毒理學雜誌
독이학잡지
JOURNAL OF HEALTH TOXICOLOGY
2005年
2期
105-107
,共3页
曾季平%王立祥%胡晓燕%于清水%秦文%崔行
曾季平%王立祥%鬍曉燕%于清水%秦文%崔行
증계평%왕립상%호효연%우청수%진문%최행
氯化钴%PC12细胞%半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶%细胞凋亡
氯化鈷%PC12細胞%半胱氨痠天鼕氨痠蛋白酶%細胞凋亡
록화고%PC12세포%반광안산천동안산단백매%세포조망
目的确定氯化钴(CoCl2)对PC12细胞的影响.方法构建CoCl2诱导的PC12细胞模型,检测CoCl2对PC12细胞的毒性作用;将Caspases的抑制基因p35转染PC12细胞得到可稳定表达p35基因的细胞株PC12/p35,检测p35对CoCl2诱导的PC12细胞的作用;检测Caspases特异性多肽抑制剂Z-VAD-FMK对CoCl2诱导的PC12细胞的作用.结果分别以100、300、500、700和1 000 μmol/L CoCl2诱导PC12细胞24 h或以500μmol/L CoCl2分别诱导PC12细胞12、24、36、48和60 h后,PC12细胞存活率均明显下降(P＜0.01),并与CoCl2诱导的时间和浓度呈正相关;细胞亚显微结构检测,流式细胞分析和DNA片段化结果也表明500 μmol/L CoCl2诱导PC12细胞24 h可使PC12细胞出现明显凋亡特征.构建可稳定表达Caspase蛋白酶抑制基因p35的PC12细胞株,或分别加入50和100 μmol/L Caspases多肽抑制剂Z-VAD-FMK预处理PC12细胞1 h后,以500μmol/L CoCl2诱导PC12细胞24 h,形态学观察结果,细胞存活率检测和流式细胞分析均表明p35基因和Z-VAD-FMK均可有效地抑制CoCl2诱导的PC12细胞凋亡(P＜0.01).结论CoCl2可诱导PC12细胞凋亡.
目的確定氯化鈷(CoCl2)對PC12細胞的影響.方法構建CoCl2誘導的PC12細胞模型,檢測CoCl2對PC12細胞的毒性作用;將Caspases的抑製基因p35轉染PC12細胞得到可穩定錶達p35基因的細胞株PC12/p35,檢測p35對CoCl2誘導的PC12細胞的作用;檢測Caspases特異性多肽抑製劑Z-VAD-FMK對CoCl2誘導的PC12細胞的作用.結果分彆以100、300、500、700和1 000 μmol/L CoCl2誘導PC12細胞24 h或以500μmol/L CoCl2分彆誘導PC12細胞12、24、36、48和60 h後,PC12細胞存活率均明顯下降(P＜0.01),併與CoCl2誘導的時間和濃度呈正相關;細胞亞顯微結構檢測,流式細胞分析和DNA片段化結果也錶明500 μmol/L CoCl2誘導PC12細胞24 h可使PC12細胞齣現明顯凋亡特徵.構建可穩定錶達Caspase蛋白酶抑製基因p35的PC12細胞株,或分彆加入50和100 μmol/L Caspases多肽抑製劑Z-VAD-FMK預處理PC12細胞1 h後,以500μmol/L CoCl2誘導PC12細胞24 h,形態學觀察結果,細胞存活率檢測和流式細胞分析均錶明p35基因和Z-VAD-FMK均可有效地抑製CoCl2誘導的PC12細胞凋亡(P＜0.01).結論CoCl2可誘導PC12細胞凋亡.
목적학정록화고(CoCl2)대PC12세포적영향.방법구건CoCl2유도적PC12세포모형,검측CoCl2대PC12세포적독성작용;장Caspases적억제기인p35전염PC12세포득도가은정표체p35기인적세포주PC12/p35,검측p35대CoCl2유도적PC12세포적작용;검측Caspases특이성다태억제제Z-VAD-FMK대CoCl2유도적PC12세포적작용.결과분별이100、300、500、700화1 000 μmol/L CoCl2유도PC12세포24 h혹이500μmol/L CoCl2분별유도PC12세포12、24、36、48화60 h후,PC12세포존활솔균명현하강(P＜0.01),병여CoCl2유도적시간화농도정정상관;세포아현미결구검측,류식세포분석화DNA편단화결과야표명500 μmol/L CoCl2유도PC12세포24 h가사PC12세포출현명현조망특정.구건가은정표체Caspase단백매억제기인p35적PC12세포주,혹분별가입50화100 μmol/L Caspases다태억제제Z-VAD-FMK예처리PC12세포1 h후,이500μmol/L CoCl2유도PC12세포24 h,형태학관찰결과,세포존활솔검측화류식세포분석균표명p35기인화Z-VAD-FMK균가유효지억제CoCl2유도적PC12세포조망(P＜0.01).결론CoCl2가유도PC12세포조망.
