药物生物技术
藥物生物技術
약물생물기술
PHARMACEUTICAL BIOTECHNOLOGY
2008年
1期
1-5
,共5页
宗英%孙铭娟%董晓毅%高云%王梁华%焦炳华
宗英%孫銘娟%董曉毅%高雲%王樑華%焦炳華
종영%손명연%동효의%고운%왕량화%초병화
激肽原%肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体%增殖抑制%血管生成抑制因子
激肽原%腫瘤壞死因子相關凋亡誘導配體%增殖抑製%血管生成抑製因子
격태원%종류배사인자상관조망유도배체%증식억제%혈관생성억제인자
用重组PCR技术得到Kininogen D5和TRAIL的融合编码序列,将该DNA片段克隆到原核表达载体pMAL-c2,重组质粒转化大肠杆菌BL21,IPTG诱导蛋白表达,得到MBP-KT和MBP-TK,经AmyloseResin亲和层析柱层析,得到初步纯化的融合蛋白.结果表明MBP-KT对胰腺癌细胞1990有明显的杀伤作用其作用的ED5.为20 ng/ml,而MBP-TK对1990的抑制作用不明显;同时,MBP-KT和MBP-KD5对内皮细胞ECV304有明显的抑制作用,MBP/KT作用于ECV304的ED50为0.1μg/ml,MBP/KD5作用于ECV304的ED50为9.5μg/ml,但是MBP-TK和TRAIL几乎无作用,表明融合蛋白KT既具抗肿瘤作用又有抗新生血管的作用.本研究为进一步开发靶向性杀伤肿瘤药物奠定了基础.
用重組PCR技術得到Kininogen D5和TRAIL的融閤編碼序列,將該DNA片段剋隆到原覈錶達載體pMAL-c2,重組質粒轉化大腸桿菌BL21,IPTG誘導蛋白錶達,得到MBP-KT和MBP-TK,經AmyloseResin親和層析柱層析,得到初步純化的融閤蛋白.結果錶明MBP-KT對胰腺癌細胞1990有明顯的殺傷作用其作用的ED5.為20 ng/ml,而MBP-TK對1990的抑製作用不明顯;同時,MBP-KT和MBP-KD5對內皮細胞ECV304有明顯的抑製作用,MBP/KT作用于ECV304的ED50為0.1μg/ml,MBP/KD5作用于ECV304的ED50為9.5μg/ml,但是MBP-TK和TRAIL幾乎無作用,錶明融閤蛋白KT既具抗腫瘤作用又有抗新生血管的作用.本研究為進一步開髮靶嚮性殺傷腫瘤藥物奠定瞭基礎.
용중조PCR기술득도Kininogen D5화TRAIL적융합편마서렬,장해DNA편단극륭도원핵표체재체pMAL-c2,중조질립전화대장간균BL21,IPTG유도단백표체,득도MBP-KT화MBP-TK,경AmyloseResin친화층석주층석,득도초보순화적융합단백.결과표명MBP-KT대이선암세포1990유명현적살상작용기작용적ED5.위20 ng/ml,이MBP-TK대1990적억제작용불명현;동시,MBP-KT화MBP-KD5대내피세포ECV304유명현적억제작용,MBP/KT작용우ECV304적ED50위0.1μg/ml,MBP/KD5작용우ECV304적ED50위9.5μg/ml,단시MBP-TK화TRAIL궤호무작용,표명융합단백KT기구항종류작용우유항신생혈관적작용.본연구위진일보개발파향성살상종류약물전정료기출.
