中国免疫学杂志
中國免疫學雜誌
중국면역학잡지
CHINESE JOURNAL OF IMMUNOLOGY
2008年
12期
1066-1070
,共5页
曾瑞红%王卫华%房桂珍%龚伟%梅兴国%魏林
曾瑞紅%王衛華%房桂珍%龔偉%梅興國%魏林
증서홍%왕위화%방계진%공위%매흥국%위림
呼吸道合胞病毒%His-tag%重组蛋白GIF/M2%免疫原性
呼吸道閤胞病毒%His-tag%重組蛋白GIF/M2%免疫原性
호흡도합포병독%His-tag%중조단백GIF/M2%면역원성
目的:观察 His-tag 是否影响 RSV 重组蛋白 GIF/M2 的免疫原性.方法:PCR 扩增 G1 和 F/M2 基因片段,插入表达载体 pET-His 和 pET-DsbA-His 中,转化E.coli BL21(DE3),IPrG 诱导表达,采用 Ni+螯合亲和层析法纯化得 His-GlF/M2 和 DsbA-His-GIF/M2,将后者用凝血酶消化,再经Ni+螯合亲和层析法纯化得 GIF/M2,将 His-GIF/M2 和 GIF/M2 免疫 BALB/c 小鼠,用 ELISSA 测定抗体滴度,MTT 法测定细胞毒性 T 细胞活性(CTL).结果:两种蛋白在BALB/ c 小鼠中诱导的 RSV 特异性抗体和 CTL 活性无显著差异.结论:His-tag 不影响 RSV 重组蛋白GIF/M2 的免疫原性.
目的:觀察 His-tag 是否影響 RSV 重組蛋白 GIF/M2 的免疫原性.方法:PCR 擴增 G1 和 F/M2 基因片段,插入錶達載體 pET-His 和 pET-DsbA-His 中,轉化E.coli BL21(DE3),IPrG 誘導錶達,採用 Ni+螯閤親和層析法純化得 His-GlF/M2 和 DsbA-His-GIF/M2,將後者用凝血酶消化,再經Ni+螯閤親和層析法純化得 GIF/M2,將 His-GIF/M2 和 GIF/M2 免疫 BALB/c 小鼠,用 ELISSA 測定抗體滴度,MTT 法測定細胞毒性 T 細胞活性(CTL).結果:兩種蛋白在BALB/ c 小鼠中誘導的 RSV 特異性抗體和 CTL 活性無顯著差異.結論:His-tag 不影響 RSV 重組蛋白GIF/M2 的免疫原性.
목적:관찰 His-tag 시부영향 RSV 중조단백 GIF/M2 적면역원성.방법:PCR 확증 G1 화 F/M2 기인편단,삽입표체재체 pET-His 화 pET-DsbA-His 중,전화E.coli BL21(DE3),IPrG 유도표체,채용 Ni+오합친화층석법순화득 His-GlF/M2 화 DsbA-His-GIF/M2,장후자용응혈매소화,재경Ni+오합친화층석법순화득 GIF/M2,장 His-GIF/M2 화 GIF/M2 면역 BALB/c 소서,용 ELISSA 측정항체적도,MTT 법측정세포독성 T 세포활성(CTL).결과:량충단백재BALB/ c 소서중유도적 RSV 특이성항체화 CTL 활성무현저차이.결론:His-tag 불영향 RSV 중조단백GIF/M2 적면역원성.
