基础医学与临床
基礎醫學與臨床
기출의학여림상
BASIC MEDICAL SCIENCES AND CLINICS
2009年
6期
570-574
,共5页
陈慧毅%卢捷%李瑞%辛中帅%阴彬%龚燕华%彭小忠
陳慧毅%盧捷%李瑞%辛中帥%陰彬%龔燕華%彭小忠
진혜의%로첩%리서%신중수%음빈%공연화%팽소충
HCV%亚基因组复制子%电穿孔
HCV%亞基因組複製子%電穿孔
HCV%아기인조복제자%전천공
目的 建立一个稳定支持中国人群HCV 1b亚基因组高效复制的体外细胞模型.方法 构建中国人群HCV1b亚型亚基因组复制子质粒,通过体外转录的方法获得亚基因组复制子RNA,采用电穿孔技术把RNA转染到Huh-7.5.1细胞中,经过G418筛选含有HCV 1b亚基因组的细胞集落.RT-PCR检测细胞集落中的HCV亚基因组以及Western blot检测细胞集落中的HCV蛋白的表达.用干扰素(IFN)处理含有HCV亚基因组的细胞,观察细胞中HCV RNA的变化.结果 G418药物筛选得到了支持HCV1b亚基因组复制的细胞集落.RT-PCR检测有HCVRNA NS4B的表达,Western blot检测有HCV的非结构蛋白NS5B的表达.IFN处理含有HCV复制子的细胞,HCVRNA水平明显降低.结论 成功建立了支持中国人群HCV 1b亚基因组高效复制的体外细胞模型,为进一步研究HCV致病机制、治疗药物筛选及疫苗方面的研究打下了基础.
目的 建立一箇穩定支持中國人群HCV 1b亞基因組高效複製的體外細胞模型.方法 構建中國人群HCV1b亞型亞基因組複製子質粒,通過體外轉錄的方法穫得亞基因組複製子RNA,採用電穿孔技術把RNA轉染到Huh-7.5.1細胞中,經過G418篩選含有HCV 1b亞基因組的細胞集落.RT-PCR檢測細胞集落中的HCV亞基因組以及Western blot檢測細胞集落中的HCV蛋白的錶達.用榦擾素(IFN)處理含有HCV亞基因組的細胞,觀察細胞中HCV RNA的變化.結果 G418藥物篩選得到瞭支持HCV1b亞基因組複製的細胞集落.RT-PCR檢測有HCVRNA NS4B的錶達,Western blot檢測有HCV的非結構蛋白NS5B的錶達.IFN處理含有HCV複製子的細胞,HCVRNA水平明顯降低.結論 成功建立瞭支持中國人群HCV 1b亞基因組高效複製的體外細胞模型,為進一步研究HCV緻病機製、治療藥物篩選及疫苗方麵的研究打下瞭基礎.
목적 건립일개은정지지중국인군HCV 1b아기인조고효복제적체외세포모형.방법 구건중국인군HCV1b아형아기인조복제자질립,통과체외전록적방법획득아기인조복제자RNA,채용전천공기술파RNA전염도Huh-7.5.1세포중,경과G418사선함유HCV 1b아기인조적세포집락.RT-PCR검측세포집락중적HCV아기인조이급Western blot검측세포집락중적HCV단백적표체.용간우소(IFN)처리함유HCV아기인조적세포,관찰세포중HCV RNA적변화.결과 G418약물사선득도료지지HCV1b아기인조복제적세포집락.RT-PCR검측유HCVRNA NS4B적표체,Western blot검측유HCV적비결구단백NS5B적표체.IFN처리함유HCV복제자적세포,HCVRNA수평명현강저.결론 성공건립료지지중국인군HCV 1b아기인조고효복제적체외세포모형,위진일보연구HCV치병궤제、치료약물사선급역묘방면적연구타하료기출.
