中国病理生理杂志
中國病理生理雜誌
중국병리생리잡지
CHINESE JOURNAL OF PATHOPHYSIOLOGY
2010年
6期
1085-1090
,共6页
骆世芳%龙志敏%高宝兵%汪克建%贺桂琼
駱世芳%龍誌敏%高寶兵%汪剋建%賀桂瓊
락세방%룡지민%고보병%왕극건%하계경
Nicastrin%蛋白酶体抑制剂%神经元
Nicastrin%蛋白酶體抑製劑%神經元
Nicastrin%단백매체억제제%신경원
目的:探讨蛋白酶体抑制剂能否引起神经细胞内nicastrin(NCT)蛋白表达及分布的变化,以明确NCT的蛋白降解是否与蛋白酶体有关.方法:在用人神经母细胞瘤细胞(SH-SY5Y)建立稳定表达NCT细胞株的基础上,应用蛋白酶体抑制剂处理NCT细胞株,并结合Western blotting、放射性同位素脉冲示踪技术、免疫荧光双标技术,检测蛋白酶体抑制剂处理后神经细胞内NCT的蛋白表达变化.结果:Western blotting结果显示,特异性蛋白酶体抑制剂处理后,神经细胞内源性和外源性转染的NCT的表达显著增强,高度特异的蛋白酶体抑制剂lactacystin对NCT蛋白的增强效应呈剂量依赖性和时间依赖性;放射性同位素脉冲示踪结果显示,蛋白酶体抑制剂可显著增强细胞内新合成的NCT蛋白的表达水平,其增强作用是通过阻止[35S]-NCT的蛋白降解来实现的;免疫荧光双标结果提示,NCT与泛素在细胞内共存.结论:神经细胞内NCT的降解由蛋白酶体途径介导;NCT在降解之前经泛素化修饰.
目的:探討蛋白酶體抑製劑能否引起神經細胞內nicastrin(NCT)蛋白錶達及分佈的變化,以明確NCT的蛋白降解是否與蛋白酶體有關.方法:在用人神經母細胞瘤細胞(SH-SY5Y)建立穩定錶達NCT細胞株的基礎上,應用蛋白酶體抑製劑處理NCT細胞株,併結閤Western blotting、放射性同位素脈遲示蹤技術、免疫熒光雙標技術,檢測蛋白酶體抑製劑處理後神經細胞內NCT的蛋白錶達變化.結果:Western blotting結果顯示,特異性蛋白酶體抑製劑處理後,神經細胞內源性和外源性轉染的NCT的錶達顯著增彊,高度特異的蛋白酶體抑製劑lactacystin對NCT蛋白的增彊效應呈劑量依賴性和時間依賴性;放射性同位素脈遲示蹤結果顯示,蛋白酶體抑製劑可顯著增彊細胞內新閤成的NCT蛋白的錶達水平,其增彊作用是通過阻止[35S]-NCT的蛋白降解來實現的;免疫熒光雙標結果提示,NCT與汎素在細胞內共存.結論:神經細胞內NCT的降解由蛋白酶體途徑介導;NCT在降解之前經汎素化脩飾.
목적:탐토단백매체억제제능부인기신경세포내nicastrin(NCT)단백표체급분포적변화,이명학NCT적단백강해시부여단백매체유관.방법:재용인신경모세포류세포(SH-SY5Y)건립은정표체NCT세포주적기출상,응용단백매체억제제처리NCT세포주,병결합Western blotting、방사성동위소맥충시종기술、면역형광쌍표기술,검측단백매체억제제처리후신경세포내NCT적단백표체변화.결과:Western blotting결과현시,특이성단백매체억제제처리후,신경세포내원성화외원성전염적NCT적표체현저증강,고도특이적단백매체억제제lactacystin대NCT단백적증강효응정제량의뢰성화시간의뢰성;방사성동위소맥충시종결과현시,단백매체억제제가현저증강세포내신합성적NCT단백적표체수평,기증강작용시통과조지[35S]-NCT적단백강해래실현적;면역형광쌍표결과제시,NCT여범소재세포내공존.결론:신경세포내NCT적강해유단백매체도경개도;NCT재강해지전경범소화수식.
