临床与实验病理学杂志
臨床與實驗病理學雜誌
림상여실험병이학잡지
CHINESE JOURNAL OF CLINICAL AND EXPERIMENTAL PATHOLOGY
2012年
1期
11-14
,共4页
毛俊%牟秋菊%李连宏%陶雅军%范姝君%王波%于晓棠
毛俊%牟鞦菊%李連宏%陶雅軍%範姝君%王波%于曉棠
모준%모추국%리련굉%도아군%범주군%왕파%우효당
乳腺肿瘤%Notch1%RNA干扰%凋亡
乳腺腫瘤%Notch1%RNA榦擾%凋亡
유선종류%Notch1%RNA간우%조망
目的 探讨RNA干扰技术沉默Notch1基因表达对人乳腺癌细胞增殖和凋亡的影响.方法 设计并合成靶向Notch1基因的小分子干扰RNA质粒,在转染试剂Sofast介导下转染人乳腺癌细胞株MCF-7,用RT-PCR和Western blot法检测转染前、后Notch1基因的表达,挑选干扰效率最强的一组表达载体;cck8比色法检测分析各组细胞的存活率;流式细胞术检测细胞凋亡比例;Western blot法检测转染各组MCF-7细胞Notch1、NF-κB及Caspase-3蛋白表达.结果 Notch1-shRNA能有效封闭Notch1基因的表达,Notch1基因和蛋白表达水平明显降低(P<0.05);Notch1-shRNA能明显抑制细胞增殖(P<0.05);转染48 h后细胞凋亡比例增加(P<0.01).NF-κB蛋白水平表达降低,Caspase-3蛋白表达水平增高.结论 利用RNA干扰技术沉默Notch1基因的表达可以明显抑制MCF-7细胞的增殖,促进MCF-7细胞凋亡,其机制可能通过NF-κB信号通路调节相关凋亡蛋白的表达,进而影响细胞的凋亡和增殖,靶向Notch1的RNA干扰技术在乳腺癌的基因治疗中具有一定的研究价值.
目的 探討RNA榦擾技術沉默Notch1基因錶達對人乳腺癌細胞增殖和凋亡的影響.方法 設計併閤成靶嚮Notch1基因的小分子榦擾RNA質粒,在轉染試劑Sofast介導下轉染人乳腺癌細胞株MCF-7,用RT-PCR和Western blot法檢測轉染前、後Notch1基因的錶達,挑選榦擾效率最彊的一組錶達載體;cck8比色法檢測分析各組細胞的存活率;流式細胞術檢測細胞凋亡比例;Western blot法檢測轉染各組MCF-7細胞Notch1、NF-κB及Caspase-3蛋白錶達.結果 Notch1-shRNA能有效封閉Notch1基因的錶達,Notch1基因和蛋白錶達水平明顯降低(P<0.05);Notch1-shRNA能明顯抑製細胞增殖(P<0.05);轉染48 h後細胞凋亡比例增加(P<0.01).NF-κB蛋白水平錶達降低,Caspase-3蛋白錶達水平增高.結論 利用RNA榦擾技術沉默Notch1基因的錶達可以明顯抑製MCF-7細胞的增殖,促進MCF-7細胞凋亡,其機製可能通過NF-κB信號通路調節相關凋亡蛋白的錶達,進而影響細胞的凋亡和增殖,靶嚮Notch1的RNA榦擾技術在乳腺癌的基因治療中具有一定的研究價值.
목적 탐토RNA간우기술침묵Notch1기인표체대인유선암세포증식화조망적영향.방법 설계병합성파향Notch1기인적소분자간우RNA질립,재전염시제Sofast개도하전염인유선암세포주MCF-7,용RT-PCR화Western blot법검측전염전、후Notch1기인적표체,도선간우효솔최강적일조표체재체;cck8비색법검측분석각조세포적존활솔;류식세포술검측세포조망비례;Western blot법검측전염각조MCF-7세포Notch1、NF-κB급Caspase-3단백표체.결과 Notch1-shRNA능유효봉폐Notch1기인적표체,Notch1기인화단백표체수평명현강저(P<0.05);Notch1-shRNA능명현억제세포증식(P<0.05);전염48 h후세포조망비례증가(P<0.01).NF-κB단백수평표체강저,Caspase-3단백표체수평증고.결론 이용RNA간우기술침묵Notch1기인적표체가이명현억제MCF-7세포적증식,촉진MCF-7세포조망,기궤제가능통과NF-κB신호통로조절상관조망단백적표체,진이영향세포적조망화증식,파향Notch1적RNA간우기술재유선암적기인치료중구유일정적연구개치.
