中国预防兽医学报
中國預防獸醫學報
중국예방수의학보
CHINESE JOURNAL OF PREVENTIVE VETERINARY MEDICINE
2012年
4期
309-312
,共4页
王芳%刘晓丽%赵飞%韩宗玺%邵昱昊%孔宪刚%刘胜旺
王芳%劉曉麗%趙飛%韓宗璽%邵昱昊%孔憲剛%劉勝旺
왕방%류효려%조비%한종새%소욱호%공헌강%류성왕
传染性支气管炎病毒%单克隆抗体%肽扫描%表位
傳染性支氣管炎病毒%單剋隆抗體%肽掃描%錶位
전염성지기관염병독%단극륭항체%태소묘%표위
为鉴定传染性支气管炎病毒(IBV)的抗原表位,本研究将IBV ck/CH/LDL/091022株免疫6周龄～8周龄BALB/c小鼠,将小鼠脾脏细胞与骨髓瘤细胞SP2/0融合,经过有限稀释法克隆筛选,得到一株针对IBV核衣壳(N)蛋白的单克隆抗体(MAb)2F2,经鉴定其染色体数目为101条,MAb亚类鉴定其重链属于IgG1,轻链属于K链.用肽扫描方法将IBV ck/CH/LDL/091022株N基因截短为具有相互部分重叠的23段,表达带GST标签的重组蛋白,与MAb 2F2进行western blot和ELISA反应后,鉴定其表位为397INWGDSAL404.将表位序列进行Blast结果表明,本研究鉴定的表位在大部分IBV株中均为保守抗原表位,为进一步建立IBV的检测方法奠定了基础.
為鑒定傳染性支氣管炎病毒(IBV)的抗原錶位,本研究將IBV ck/CH/LDL/091022株免疫6週齡～8週齡BALB/c小鼠,將小鼠脾髒細胞與骨髓瘤細胞SP2/0融閤,經過有限稀釋法剋隆篩選,得到一株針對IBV覈衣殼(N)蛋白的單剋隆抗體(MAb)2F2,經鑒定其染色體數目為101條,MAb亞類鑒定其重鏈屬于IgG1,輕鏈屬于K鏈.用肽掃描方法將IBV ck/CH/LDL/091022株N基因截短為具有相互部分重疊的23段,錶達帶GST標籤的重組蛋白,與MAb 2F2進行western blot和ELISA反應後,鑒定其錶位為397INWGDSAL404.將錶位序列進行Blast結果錶明,本研究鑒定的錶位在大部分IBV株中均為保守抗原錶位,為進一步建立IBV的檢測方法奠定瞭基礎.
위감정전염성지기관염병독(IBV)적항원표위,본연구장IBV ck/CH/LDL/091022주면역6주령～8주령BALB/c소서,장소서비장세포여골수류세포SP2/0융합,경과유한희석법극륭사선,득도일주침대IBV핵의각(N)단백적단극륭항체(MAb)2F2,경감정기염색체수목위101조,MAb아류감정기중련속우IgG1,경련속우K련.용태소묘방법장IBV ck/CH/LDL/091022주N기인절단위구유상호부분중첩적23단,표체대GST표첨적중조단백,여MAb 2F2진행western blot화ELISA반응후,감정기표위위397INWGDSAL404.장표위서렬진행Blast결과표명,본연구감정적표위재대부분IBV주중균위보수항원표위,위진일보건립IBV적검측방법전정료기출.
