牛Dgat1基因高GC含量片段的定点突变
우Dgat1기인고GC함량편단적정점돌변
Site-directed mutagenesis of GC-rich fragment in bovine Dgat1 gene
  • 万方数据
    东北农业大学学报 동북농업대학학보
    JOURNAL OF NORTHEAST AGRICULTURAL UNIVERSITY
    2012年 6期 65-68 ,共4页

    杨斐斐%刘新峰%葛秀国%丁向彬%宋桂敏%李光鹏%郭宏

    양비비%류신봉%갈수국%정향빈%송계민%리광붕%곽굉

    定点突变%高GC含量%牛Dgat1基因%232位点 定點突變%高GC含量%牛Dgat1基因%232位點
    정점돌변%고GC함량%우Dgat1기인%232위점
    将扩增出的1.8kb目的片段克隆入pUCm-T载体,以构建好的质粒为模板进行突变反应.Dpn Ⅰ酶切反应产物,去除甲基化及半甲基化DNA模板.酶切产物经纯化后转入DH5α感受态细胞,提取质粒测序.结果表明,双核苷酸碱基AA突变为GC,成功得到突变载体.将定点突变试剂盒方法加以改进,完成GC含量高达69.5％模板定点突变,改进后的方法操作简单、经济实用,有效地解决了高GC含量模板难突变难题.
    장확증출적1.8kb목적편단극륭입pUCm-T재체,이구건호적질립위모판진행돌변반응.Dpn Ⅰ매절반응산물,거제갑기화급반갑기화DNA모판.매절산물경순화후전입DH5α감수태세포,제취질립측서.결과표명,쌍핵감산감기AA돌변위GC,성공득도돌변재체.장정점돌변시제합방법가이개진,완성GC함량고체69.5％모판정점돌변,개진후적방법조작간단、경제실용,유효지해결료고GC함량모판난돌변난제.
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