CAJ | 학술논문

本研究旨在研究不同浓度葡萄糖和胰岛素诱导鹅肝脂肪变性过程中苹果酸酶( Malic enzyme,ME)的活性及其mRNA表达情况,以探讨ME在鹅肝脂肪变性中的作用.根据鸡ME基因序列保守区设计引物,通过RT-PCR、克隆测序等技术扩增鹅ME基因；分离、培养四川白鹅原代肝细胞,添加不同浓度葡萄糖和胰岛素诱导肝细胞脂肪变性,检测细胞内甘油三酯(TG)含量、ME活性及其mRNA表达情况.结果发现,鹅ME基因跟原鸡同源性最高；与对照组相比,葡萄糖及其与胰岛素协同作用均能显著促进肝细胞内甘油三酯(TG)沉积,且呈现出剂量递增效应,而胰岛素对细胞内TG含量影响不明显；与对照组比较得出:ME的活性和mRNA表达水平随着葡萄糖浓度升高而增加,30 mmol·L-1葡萄糖具有明显的促进作用(P＜0.05)；低浓度(50 nmol· L-1)胰岛素显著增加ME的活性和mRNA表达水平(P＜0.05),当胰岛素浓度达到200 nmol·L-1时,ME的活性和mRNA表达水平受到一定抑制；葡萄糖和低浓度胰岛素(50 nmol·L-1)协同能促进ME的活性和mRNA表达水平.本研究扩增获得了鹅ME基因部分序列,且发现葡萄糖和胰岛素协同可以增强ME的活性和mRNA表达水平,从而显著增加肝脏中TG的含量,诱导鹅肝脂肪变性.
본연구지재연구불동농도포도당화이도소유도아간지방변성과정중평과산매( Malic enzyme,ME)적활성급기mRNA표체정황,이탐토ME재아간지방변성중적작용.근거계ME기인서렬보수구설계인물,통과RT-PCR、극륭측서등기술확증아ME기인；분리、배양사천백아원대간세포,첨가불동농도포도당화이도소유도간세포지방변성,검측세포내감유삼지(TG)함량、ME활성급기mRNA표체정황.결과발현,아ME기인근원계동원성최고；여대조조상비,포도당급기여이도소협동작용균능현저촉진간세포내감유삼지(TG)침적,차정현출제량체증효응,이이도소대세포내TG함량영향불명현；여대조조비교득출:ME적활성화mRNA표체수평수착포도당농도승고이증가,30 mmol·L-1포도당구유명현적촉진작용(P＜0.05)；저농도(50 nmol· L-1)이도소현저증가ME적활성화mRNA표체수평(P＜0.05),당이도소농도체도200 nmol·L-1시,ME적활성화mRNA표체수평수도일정억제；포도당화저농도이도소(50 nmol·L-1)협동능촉진ME적활성화mRNA표체수평.본연구확증획득료아ME기인부분서렬,차발현포도당화이도소협동가이증강ME적활성화mRNA표체수평,종이현저증가간장중TG적함량,유도아간지방변성.