CAJ | 학술논문

目的:建立含突变型p53和EB病毒LMP1基因的双转基因小鼠模型,为研究突变型p53和EB病毒LMP1基因在鼻咽癌前病变中的交互作用提供有力的工具. 方法:通过分子克隆技术构建含突变型p53基因和EB病毒LMP1基因的真核表达载体pLMP1-p53mt;采用显微注射法将线性化的表达载体注射至小鼠受精卵的雄性原核中,然后将注射存活的受精卵植入假孕母鼠的输卵管;取其产3 wk龄子代鼠进行PCR初选,再通过Southern杂交进一步确证;利用HE染色法观察4 mo龄转基因小鼠不同组织病理变化. 结果:将转基因载体进行了707枚小鼠受精卵的显微注射,然后植入30只假孕母鼠的输卵管中,其中26只母鼠怀孕,移植成功率为86.67%;共出生子代鼠179只;PCR检测显示179只子代小鼠中有9只整合了p53mt和LMP1基因,转基因阳性小鼠比例为5.03%(9/179),Southern杂交结果进一步证实了9只基因组整合了外源基因的首建者小鼠;随机抽取其中的1只转基因阳性小鼠鼻腔黏膜、鼻咽、食管表现炎症,鼻咽黏膜上皮灶性增生. 结论:成功建立整合人突变型p53和LMP1的转基因小鼠,且表现鼻咽黏膜上皮灶性增生,可为鼻咽癌前病变机制的研究提供手段.
목적:건립함돌변형p53화EB병독LMP1기인적쌍전기인소서모형,위연구돌변형p53화EB병독LMP1기인재비인암전병변중적교호작용제공유력적공구. 방법:통과분자극륭기술구건함돌변형p53기인화EB병독LMP1기인적진핵표체재체pLMP1-p53mt;채용현미주사법장선성화적표체재체주사지소서수정란적웅성원핵중,연후장주사존활적수정란식입가잉모서적수란관;취기산3 wk령자대서진행PCR초선,재통과Southern잡교진일보학증;이용HE염색법관찰4 mo령전기인소서불동조직병리변화. 결과:장전기인재체진행료707매소서수정란적현미주사,연후식입30지가잉모서적수란관중,기중26지모서부잉,이식성공솔위86.67%;공출생자대서179지;PCR검측현시179지자대소서중유9지정합료p53mt화LMP1기인,전기인양성소서비례위5.03%(9/179),Southern잡교결과진일보증실료9지기인조정합료외원기인적수건자소서;수궤추취기중적1지전기인양성소서비강점막、비인、식관표현염증,비인점막상피조성증생. 결론:성공건립정합인돌변형p53화LMP1적전기인소서,차표현비인점막상피조성증생,가위비인암전병변궤제적연구제공수단.