水产学报
水產學報
수산학보
JOURNAL OF FISHERIES OF CHINA
2006年
4期
525-530
,共6页
杨鸢劼%俞菊华%陈辉%方苹%郭闯
楊鳶劼%俞菊華%陳輝%方蘋%郭闖
양연할%유국화%진휘%방평%곽틈
暗纹东方鲀%非01群霍乱弧菌%肠毒素ctxA
暗紋東方鲀%非01群霍亂弧菌%腸毒素ctxA
암문동방돈%비01군곽란호균%장독소ctxA
在对养殖暗纹东方鲀病害调查中,从呈典型症状病鱼腹腔和肠道粘液中分离到2株(J-1和H-3)菌株,经生化特性和血清型鉴定为非01群霍乱弧菌(Non-01 Vibrio cholerae).注射、创伤和浸泡3种方式进行人工感染试验表现出较强的致病性,出现症状与自然发病鱼相同.为进一步确认分离菌株的分类地位,使用P1、P2引物,以非01群霍乱弧菌N92001菌株和01群霍乱弧菌N16961菌株为对照,对分离菌株进行PCR扩增,得到451bp的DNA片段.根据现有霍乱弧菌肠毒素ctxA基因序列设计引物P3,P4,以N16961菌株为阳性对照,PCR扩增结果均得到大小为400 bp的DNA片段.在对H-3菌株的扩增片段进行纯化、克隆和测序,得到407bp序列,该菌株与N16961菌株中肠毒素ctxA基因序列的完全一致,证实该片段源于ctxA基因.进一步说明从暗纹东方鲀体内分离到的J-1和H-3菌株具有霍乱肠毒素ctxA,有一定的致病力.
在對養殖暗紋東方鲀病害調查中,從呈典型癥狀病魚腹腔和腸道粘液中分離到2株(J-1和H-3)菌株,經生化特性和血清型鑒定為非01群霍亂弧菌(Non-01 Vibrio cholerae).註射、創傷和浸泡3種方式進行人工感染試驗錶現齣較彊的緻病性,齣現癥狀與自然髮病魚相同.為進一步確認分離菌株的分類地位,使用P1、P2引物,以非01群霍亂弧菌N92001菌株和01群霍亂弧菌N16961菌株為對照,對分離菌株進行PCR擴增,得到451bp的DNA片段.根據現有霍亂弧菌腸毒素ctxA基因序列設計引物P3,P4,以N16961菌株為暘性對照,PCR擴增結果均得到大小為400 bp的DNA片段.在對H-3菌株的擴增片段進行純化、剋隆和測序,得到407bp序列,該菌株與N16961菌株中腸毒素ctxA基因序列的完全一緻,證實該片段源于ctxA基因.進一步說明從暗紋東方鲀體內分離到的J-1和H-3菌株具有霍亂腸毒素ctxA,有一定的緻病力.
재대양식암문동방돈병해조사중,종정전형증상병어복강화장도점액중분리도2주(J-1화H-3)균주,경생화특성화혈청형감정위비01군곽란호균(Non-01 Vibrio cholerae).주사、창상화침포3충방식진행인공감염시험표현출교강적치병성,출현증상여자연발병어상동.위진일보학인분리균주적분류지위,사용P1、P2인물,이비01군곽란호균N92001균주화01군곽란호균N16961균주위대조,대분리균주진행PCR확증,득도451bp적DNA편단.근거현유곽란호균장독소ctxA기인서렬설계인물P3,P4,이N16961균주위양성대조,PCR확증결과균득도대소위400 bp적DNA편단.재대H-3균주적확증편단진행순화、극륭화측서,득도407bp서렬,해균주여N16961균주중장독소ctxA기인서렬적완전일치,증실해편단원우ctxA기인.진일보설명종암문동방돈체내분리도적J-1화H-3균주구유곽란장독소ctxA,유일정적치병력.
