生物工程学报
生物工程學報
생물공정학보
CHINESE JOURNAL OF BIOTECHNOLOGY
2006年
3期
451-456
,共6页
顾取良%张添元%罗进贤%甘菁菁%肖凡
顧取良%張添元%囉進賢%甘菁菁%肖凡
고취량%장첨원%라진현%감정정%초범
tumstatin%基因表达%毕赤酵母%活性分析
tumstatin%基因錶達%畢赤酵母%活性分析
tumstatin%기인표체%필적효모%활성분석
利用PCR技术从重组质粒pET-3c-tum中扩增人tumstatin的cDNA片段,连入pPICZαA酵母表达载体,获得的重组质粒pPICZα-tum电激法转化毕赤酵母GS115.经表型鉴定、诱导表达筛选,得到可分泌表达人tumstatin的重组酵母转化子,表达蛋白质的相对分子量约30kD,表达量约25mg/L.表达上清经超滤浓缩和离子交换法初步纯化,所得产物具有免疫活性,能够抑制内皮细胞增殖,诱导其发生细胞凋亡,并能抑制鸡胚尿囊膜血管生成.
利用PCR技術從重組質粒pET-3c-tum中擴增人tumstatin的cDNA片段,連入pPICZαA酵母錶達載體,穫得的重組質粒pPICZα-tum電激法轉化畢赤酵母GS115.經錶型鑒定、誘導錶達篩選,得到可分泌錶達人tumstatin的重組酵母轉化子,錶達蛋白質的相對分子量約30kD,錶達量約25mg/L.錶達上清經超濾濃縮和離子交換法初步純化,所得產物具有免疫活性,能夠抑製內皮細胞增殖,誘導其髮生細胞凋亡,併能抑製鷄胚尿囊膜血管生成.
이용PCR기술종중조질립pET-3c-tum중확증인tumstatin적cDNA편단,련입pPICZαA효모표체재체,획득적중조질립pPICZα-tum전격법전화필적효모GS115.경표형감정、유도표체사선,득도가분비표체인tumstatin적중조효모전화자,표체단백질적상대분자량약30kD,표체량약25mg/L.표체상청경초려농축화리자교환법초보순화,소득산물구유면역활성,능구억제내피세포증식,유도기발생세포조망,병능억제계배뇨낭막혈관생성.
