黑龙江畜牧兽医
黑龍江畜牧獸醫
흑룡강축목수의
HEILONGJIANG JOURNAL OF ANIMAL SCIENCE AND VETERINARY MEDICINE
2007年
2期
19-22
,共4页
胡媛媛%宋建领%张富强%郭松辉%王金萍
鬍媛媛%宋建領%張富彊%郭鬆輝%王金萍
호원원%송건령%장부강%곽송휘%왕금평
禽流感病毒%H5N1亚型%核蛋白%表达
禽流感病毒%H5N1亞型%覈蛋白%錶達
금류감병독%H5N1아형%핵단백%표체
根据已知H5N1亚型禽流感病毒NP基因序列设计、合成PCR克隆引物.自H5N1阳性病料中提取总RNA,反转录后采用高可信度DNA聚合酶,经PCR 扩增NP基因,采用Invitrogen定向表达系统进行克隆表达,纯化获得N末端携带多聚组氨酸标签的重组NP蛋白,分子质量约66.0 ku.采用单克隆抗体和阳性血清经ELISA、免疫印迹分析重组蛋白的免疫反应性.结果表明:所获得的重组NP蛋白在ELISA分析中均能与阳性血清和单克隆抗体发生特异性结合,但在免疫印迹分析中仅与阳性血清发生特异性结合.
根據已知H5N1亞型禽流感病毒NP基因序列設計、閤成PCR剋隆引物.自H5N1暘性病料中提取總RNA,反轉錄後採用高可信度DNA聚閤酶,經PCR 擴增NP基因,採用Invitrogen定嚮錶達繫統進行剋隆錶達,純化穫得N末耑攜帶多聚組氨痠標籤的重組NP蛋白,分子質量約66.0 ku.採用單剋隆抗體和暘性血清經ELISA、免疫印跡分析重組蛋白的免疫反應性.結果錶明:所穫得的重組NP蛋白在ELISA分析中均能與暘性血清和單剋隆抗體髮生特異性結閤,但在免疫印跡分析中僅與暘性血清髮生特異性結閤.
근거이지H5N1아형금류감병독NP기인서렬설계、합성PCR극륭인물.자H5N1양성병료중제취총RNA,반전록후채용고가신도DNA취합매,경PCR 확증NP기인,채용Invitrogen정향표체계통진행극륭표체,순화획득N말단휴대다취조안산표첨적중조NP단백,분자질량약66.0 ku.채용단극륭항체화양성혈청경ELISA、면역인적분석중조단백적면역반응성.결과표명:소획득적중조NP단백재ELISA분석중균능여양성혈청화단극륭항체발생특이성결합,단재면역인적분석중부여양성혈청발생특이성결합.
