天津科技大学学报
天津科技大學學報
천진과기대학학보
JOURNAL OF TIANJIN UNIVERSITY OF SCIENCE & TECHNOLOGY
2008年
1期
29-32
,共4页
邓元告%侯李君%邓丽珍%施定基
鄧元告%侯李君%鄧麗珍%施定基
산원고%후리군%산려진%시정기
对虾白斑病毒VP28基因%聚球藻7002%穿梭表达载体%三亲接合转移
對蝦白斑病毒VP28基因%聚毬藻7002%穿梭錶達載體%三親接閤轉移
대하백반병독VP28기인%취구조7002%천사표체재체%삼친접합전이
通过PCR从实验室保存的pMD-VP28质粒中扩增得到对虾白斑病毒囊膜蛋白VP28基因,同时在设计的引物起始密码子前添加促进外源基因在蓝藻中表达的SD序列,引物末端添加限制性内切酶住点BamH I和EcoR I,从质粒pRL-439获得强启动子PpsbA,酶切连接构建了pDC-VP28高效表达穿梭裁体.利用三亲接合转移成功地将构建的栽体pDC-VP28转化聚球藻7002.对转基因聚球藻进行培养,其表达产物通过SDS-PAGE分析,发现表达量达3%左右.
通過PCR從實驗室保存的pMD-VP28質粒中擴增得到對蝦白斑病毒囊膜蛋白VP28基因,同時在設計的引物起始密碼子前添加促進外源基因在藍藻中錶達的SD序列,引物末耑添加限製性內切酶住點BamH I和EcoR I,從質粒pRL-439穫得彊啟動子PpsbA,酶切連接構建瞭pDC-VP28高效錶達穿梭裁體.利用三親接閤轉移成功地將構建的栽體pDC-VP28轉化聚毬藻7002.對轉基因聚毬藻進行培養,其錶達產物通過SDS-PAGE分析,髮現錶達量達3%左右.
통과PCR종실험실보존적pMD-VP28질립중확증득도대하백반병독낭막단백VP28기인,동시재설계적인물기시밀마자전첨가촉진외원기인재람조중표체적SD서렬,인물말단첨가한제성내절매주점BamH I화EcoR I,종질립pRL-439획득강계동자PpsbA,매절련접구건료pDC-VP28고효표체천사재체.이용삼친접합전이성공지장구건적재체pDC-VP28전화취구조7002.대전기인취구조진행배양,기표체산물통과SDS-PAGE분석,발현표체량체3%좌우.
