军事医学科学院院刊
軍事醫學科學院院刊
군사의학과학원원간
BULLETIN OF THE ACADEMY OF MILITARY MEDICAL SCIENCES
2008年
2期
126-128,143
,共4页
赵瑾%陈泽良%王玉飞%乔凤%杜昕颖%张伶%黄留玉
趙瑾%陳澤良%王玉飛%喬鳳%杜昕穎%張伶%黃留玉
조근%진택량%왕옥비%교봉%두흔영%장령%황류옥
变形杆菌,奇异%基因组文库%序列分析
變形桿菌,奇異%基因組文庫%序列分析
변형간균,기이%기인조문고%서렬분석
目的:构建用于筛选奇异变形菌的特异序列的基因组文库,并从中筛选变形杆菌特异的标识序列.方法:提取奇异变形菌的基因组DNA,用Sau3AI部分酶切,回收酶切产物,然后与BamHⅠ酶切的pUC19质粒连接,转化JM109,构建奇异变形菌的基因组文库.随机挑取抗性克隆,用位于质粒上的引物进行扩增,确定插入片段的大小及分布情况.DNA测序确定部分克隆中插入的序列,根据序列设计引物,分析这些序列在奇异变形菌临床分离株中的分布,验证序列的特异性.结果:成功构建了奇异变形菌的基因组文库,库容量达到1.1×105 CFU.阳性克隆的比例为95%,插入片段大小主要分布在200~500 bp的范围.对其中14个克隆进行了序列测定,其中5个片段与已知序列有一定的同源性,另外9个与已知序列没有同源性,特异性分析发现了几个较好的标识序列.结论:成功构建了奇异变形菌的基因组文库,利用该文库发现了奇异变形菌特异的序列.
目的:構建用于篩選奇異變形菌的特異序列的基因組文庫,併從中篩選變形桿菌特異的標識序列.方法:提取奇異變形菌的基因組DNA,用Sau3AI部分酶切,迴收酶切產物,然後與BamHⅠ酶切的pUC19質粒連接,轉化JM109,構建奇異變形菌的基因組文庫.隨機挑取抗性剋隆,用位于質粒上的引物進行擴增,確定插入片段的大小及分佈情況.DNA測序確定部分剋隆中插入的序列,根據序列設計引物,分析這些序列在奇異變形菌臨床分離株中的分佈,驗證序列的特異性.結果:成功構建瞭奇異變形菌的基因組文庫,庫容量達到1.1×105 CFU.暘性剋隆的比例為95%,插入片段大小主要分佈在200~500 bp的範圍.對其中14箇剋隆進行瞭序列測定,其中5箇片段與已知序列有一定的同源性,另外9箇與已知序列沒有同源性,特異性分析髮現瞭幾箇較好的標識序列.結論:成功構建瞭奇異變形菌的基因組文庫,利用該文庫髮現瞭奇異變形菌特異的序列.
목적:구건용우사선기이변형균적특이서렬적기인조문고,병종중사선변형간균특이적표식서렬.방법:제취기이변형균적기인조DNA,용Sau3AI부분매절,회수매절산물,연후여BamHⅠ매절적pUC19질립련접,전화JM109,구건기이변형균적기인조문고.수궤도취항성극륭,용위우질립상적인물진행확증,학정삽입편단적대소급분포정황.DNA측서학정부분극륭중삽입적서렬,근거서렬설계인물,분석저사서렬재기이변형균림상분리주중적분포,험증서렬적특이성.결과:성공구건료기이변형균적기인조문고,고용량체도1.1×105 CFU.양성극륭적비례위95%,삽입편단대소주요분포재200~500 bp적범위.대기중14개극륭진행료서렬측정,기중5개편단여이지서렬유일정적동원성,령외9개여이지서렬몰유동원성,특이성분석발현료궤개교호적표식서렬.결론:성공구건료기이변형균적기인조문고,이용해문고발현료기이변형균특이적서렬.
