山东医药
山東醫藥
산동의약
SHANDONG MEDICAL JOURNAL
2008年
26期
18-20
,共3页
王忱%史玉荣%胡凡果%牛瑞芳%郝希山
王忱%史玉榮%鬍凡果%牛瑞芳%郝希山
왕침%사옥영%호범과%우서방%학희산
结肠肿瘤%结肠癌%短发卡RNA%缺氧诱导因子-1α
結腸腫瘤%結腸癌%短髮卡RNA%缺氧誘導因子-1α
결장종류%결장암%단발잡RNA%결양유도인자-1α
目的 构建靶向缺氧诱导因子-1α特异性短发卡RNA(shRNA)的真核表达载体,为结肠癌的靶向治疗奠定基础.方法 设计、合成针对缺氧诱导因子-1α的特异性短链寡核苷酸,构建缺氧诱导因子-1α特异性shRNA的重组质粒,稳定转染结肠癌SW480细胞;采用氯化钴制备缺氧诱导培养基,模拟肿瘤缺氧状态.采用实时定量聚合酶链反应和免疫印迹法检测转染前后SW480细胞中缺氧诱导因子-1α的表达;MTT法检测SW480细胞活性.结果 经酶切和测序鉴定,成功构建HIF-1α特异性shRNA的重组质粒,并能转染SW480细胞.转染后,缺氧诱导因子-1α mRNA和蛋白水平表达分别下降约86.1%和79.7%,肿瘤细胞增殖活性明显降低.结论 运用pGenesil-1质粒载体构建的靶向HIF-1α特异性shRNA的重组质粒已成功构建,该质粒可转染SW480细胞,有效抑制HIF-1α的表达;本研究可为结肠癌的靶向治疗提供新方法.
目的 構建靶嚮缺氧誘導因子-1α特異性短髮卡RNA(shRNA)的真覈錶達載體,為結腸癌的靶嚮治療奠定基礎.方法 設計、閤成針對缺氧誘導因子-1α的特異性短鏈寡覈苷痠,構建缺氧誘導因子-1α特異性shRNA的重組質粒,穩定轉染結腸癌SW480細胞;採用氯化鈷製備缺氧誘導培養基,模擬腫瘤缺氧狀態.採用實時定量聚閤酶鏈反應和免疫印跡法檢測轉染前後SW480細胞中缺氧誘導因子-1α的錶達;MTT法檢測SW480細胞活性.結果 經酶切和測序鑒定,成功構建HIF-1α特異性shRNA的重組質粒,併能轉染SW480細胞.轉染後,缺氧誘導因子-1α mRNA和蛋白水平錶達分彆下降約86.1%和79.7%,腫瘤細胞增殖活性明顯降低.結論 運用pGenesil-1質粒載體構建的靶嚮HIF-1α特異性shRNA的重組質粒已成功構建,該質粒可轉染SW480細胞,有效抑製HIF-1α的錶達;本研究可為結腸癌的靶嚮治療提供新方法.
목적 구건파향결양유도인자-1α특이성단발잡RNA(shRNA)적진핵표체재체,위결장암적파향치료전정기출.방법 설계、합성침대결양유도인자-1α적특이성단련과핵감산,구건결양유도인자-1α특이성shRNA적중조질립,은정전염결장암SW480세포;채용록화고제비결양유도배양기,모의종류결양상태.채용실시정량취합매련반응화면역인적법검측전염전후SW480세포중결양유도인자-1α적표체;MTT법검측SW480세포활성.결과 경매절화측서감정,성공구건HIF-1α특이성shRNA적중조질립,병능전염SW480세포.전염후,결양유도인자-1α mRNA화단백수평표체분별하강약86.1%화79.7%,종류세포증식활성명현강저.결론 운용pGenesil-1질립재체구건적파향HIF-1α특이성shRNA적중조질립이성공구건,해질립가전염SW480세포,유효억제HIF-1α적표체;본연구가위결장암적파향치료제공신방법.
