福建农林大学学报(自然科学版)
福建農林大學學報(自然科學版)
복건농림대학학보(자연과학판)
JOURNAL OF FUJIAN AGRICULTURAL UNIVERSITY
2010年
3期
241-245
,共5页
钟凤林%郭志雄%林琳%马传营%潘东明
鐘鳳林%郭誌雄%林琳%馬傳營%潘東明
종봉림%곽지웅%림림%마전영%반동명
琯溪蜜柚%Beta-tubulin%cDNA%序列分析%同源性分析
琯溪蜜柚%Beta-tubulin%cDNA%序列分析%同源性分析
관계밀유%Beta-tubulin%cDNA%서렬분석%동원성분석
以琯溪蜜柚汁胞为材料,采用cDNA克隆方法进行Beta-tubulin cDNA的克隆和表达.结果表明:琯溪蜜柚果肉Beta-tubulin cDNA全长1636 bp,有完整的阅读框,编码444个氨基酸;5′非翻译区60 bp,3′非翻译区243 bp(不包含终止密码子TAA),其中包括1个多聚腺苷酸化信号AATAAA以及1个含21个腺苷酸的poly(A)尾.由琯溪蜜柚果肉Beta-tubulin cDNA推导的氨基酸序列与陆地棉(Gossypium hirsutum)、大豆(Glycine max)、杨属植物(Populus)等的同源性较高,分别为86%、85%、84%等.通过构建重组质粒p28-PTU,并转化至Trans Rosetta(DE3)中,在诱导温度为37 ℃、IPTG浓度为1 mm、诱导时间为4 h的条件下,其在大肠杆菌宿主中获得了表达.
以琯溪蜜柚汁胞為材料,採用cDNA剋隆方法進行Beta-tubulin cDNA的剋隆和錶達.結果錶明:琯溪蜜柚果肉Beta-tubulin cDNA全長1636 bp,有完整的閱讀框,編碼444箇氨基痠;5′非翻譯區60 bp,3′非翻譯區243 bp(不包含終止密碼子TAA),其中包括1箇多聚腺苷痠化信號AATAAA以及1箇含21箇腺苷痠的poly(A)尾.由琯溪蜜柚果肉Beta-tubulin cDNA推導的氨基痠序列與陸地棉(Gossypium hirsutum)、大豆(Glycine max)、楊屬植物(Populus)等的同源性較高,分彆為86%、85%、84%等.通過構建重組質粒p28-PTU,併轉化至Trans Rosetta(DE3)中,在誘導溫度為37 ℃、IPTG濃度為1 mm、誘導時間為4 h的條件下,其在大腸桿菌宿主中穫得瞭錶達.
이관계밀유즙포위재료,채용cDNA극륭방법진행Beta-tubulin cDNA적극륭화표체.결과표명:관계밀유과육Beta-tubulin cDNA전장1636 bp,유완정적열독광,편마444개안기산;5′비번역구60 bp,3′비번역구243 bp(불포함종지밀마자TAA),기중포괄1개다취선감산화신호AATAAA이급1개함21개선감산적poly(A)미.유관계밀유과육Beta-tubulin cDNA추도적안기산서렬여륙지면(Gossypium hirsutum)、대두(Glycine max)、양속식물(Populus)등적동원성교고,분별위86%、85%、84%등.통과구건중조질립p28-PTU,병전화지Trans Rosetta(DE3)중,재유도온도위37 ℃、IPTG농도위1 mm、유도시간위4 h적조건하,기재대장간균숙주중획득료표체.