中国中西医结合杂志
中國中西醫結閤雜誌
중국중서의결합잡지
CHINESE JOURNAL OF INTEGRATED TRADITIONAL AND WESTERN MEDICINE
2010年
6期
630-635
,共6页
陈琴%黄铭涵%江时森%徐标
陳琴%黃銘涵%江時森%徐標
진금%황명함%강시삼%서표
丹参多酚酸盐%糖基化终产物%晚期内皮祖细胞%血管新生
丹參多酚痠鹽%糖基化終產物%晚期內皮祖細胞%血管新生
단삼다분산염%당기화종산물%만기내피조세포%혈관신생
目的 观察丹参多酚酸盐对糖基化终产物(advanced glycation end products,AGE)引起的晚期内皮祖细胞(endothelial progenitor cells,EPCs)功能障碍的修复作用,并探讨其中分子机制.方法 密度梯度离心法分离脐血中单个核细胞,采用EGM-2-MV培养液培养晚期EPCs;利用牛血清白蛋白及葡萄糖制备晚期糖基化修饰的白蛋白(AGE modified bovine serum albumin,AGE-albumin).实验分为单独加入200 μg/mLAGE-albumin的AGE组;同时加入200 μg/mL AGE-albumin及0.1 μg/mL、1 μg/mL、10 μg/mL的丹参多酚酸盐低、中、高剂量组;加入200μg/mL未经修饰白蛋白的对照组.采用Annexin V/PI双染法检测晚期EPCs凋亡;ECMatirx-gel检测晚期EPCs形成新生血管的能力.采用RT-PCR法检测细胞中糖基化终产物受体(the receptor for AGE,RAGE)、内皮型一氧化氮合酶(endothelial nitric oxide synthase,eNOS)mRNA水平;Western blot法检测RAGE、eNOS及蛋白激酶Akt的蛋白表达水平.结果 与对照组比较,AGE组AnnexinV+/PI-细胞比例增加,在ECMatirx-gel上形成新生血管能力降低;晚期EPCs中rage mRNA及RAGE蛋白表达增加,enos mRNA及eNOS及Akt蛋白表达减少.丹参多酚酸盐1.0、10.0 μg/mL组,与AGE组比较,晚期EPCs凋亡明显减少(P<0.05,P<0.01),在ECMatirx-gel上形成新生血管能力增加(P<0.01),晚期EPCs中RAGE表达减少(P<0.05,P<0.01),eNOS、Akt表达增加(P<0.05);与对照组比较,丹参多酚酸盐10μg/mL组对晚期EPCs凋亡及在ECMatirx-gel上形成新生血管能力,rage mRNA及RAGE,enos mRNA及eNOS,Akt蛋白表达,差异均无统计学意义(P>0.05).结论 AGE使EPCs功能受损,表现为凋亡增加、迁移及体外形成新生血管的能力下降,丹参多酚酸盐可修复由AGE-albumin引起的EPCs功能损害.
目的 觀察丹參多酚痠鹽對糖基化終產物(advanced glycation end products,AGE)引起的晚期內皮祖細胞(endothelial progenitor cells,EPCs)功能障礙的脩複作用,併探討其中分子機製.方法 密度梯度離心法分離臍血中單箇覈細胞,採用EGM-2-MV培養液培養晚期EPCs;利用牛血清白蛋白及葡萄糖製備晚期糖基化脩飾的白蛋白(AGE modified bovine serum albumin,AGE-albumin).實驗分為單獨加入200 μg/mLAGE-albumin的AGE組;同時加入200 μg/mL AGE-albumin及0.1 μg/mL、1 μg/mL、10 μg/mL的丹參多酚痠鹽低、中、高劑量組;加入200μg/mL未經脩飾白蛋白的對照組.採用Annexin V/PI雙染法檢測晚期EPCs凋亡;ECMatirx-gel檢測晚期EPCs形成新生血管的能力.採用RT-PCR法檢測細胞中糖基化終產物受體(the receptor for AGE,RAGE)、內皮型一氧化氮閤酶(endothelial nitric oxide synthase,eNOS)mRNA水平;Western blot法檢測RAGE、eNOS及蛋白激酶Akt的蛋白錶達水平.結果 與對照組比較,AGE組AnnexinV+/PI-細胞比例增加,在ECMatirx-gel上形成新生血管能力降低;晚期EPCs中rage mRNA及RAGE蛋白錶達增加,enos mRNA及eNOS及Akt蛋白錶達減少.丹參多酚痠鹽1.0、10.0 μg/mL組,與AGE組比較,晚期EPCs凋亡明顯減少(P<0.05,P<0.01),在ECMatirx-gel上形成新生血管能力增加(P<0.01),晚期EPCs中RAGE錶達減少(P<0.05,P<0.01),eNOS、Akt錶達增加(P<0.05);與對照組比較,丹參多酚痠鹽10μg/mL組對晚期EPCs凋亡及在ECMatirx-gel上形成新生血管能力,rage mRNA及RAGE,enos mRNA及eNOS,Akt蛋白錶達,差異均無統計學意義(P>0.05).結論 AGE使EPCs功能受損,錶現為凋亡增加、遷移及體外形成新生血管的能力下降,丹參多酚痠鹽可脩複由AGE-albumin引起的EPCs功能損害.
목적 관찰단삼다분산염대당기화종산물(advanced glycation end products,AGE)인기적만기내피조세포(endothelial progenitor cells,EPCs)공능장애적수복작용,병탐토기중분자궤제.방법 밀도제도리심법분리제혈중단개핵세포,채용EGM-2-MV배양액배양만기EPCs;이용우혈청백단백급포도당제비만기당기화수식적백단백(AGE modified bovine serum albumin,AGE-albumin).실험분위단독가입200 μg/mLAGE-albumin적AGE조;동시가입200 μg/mL AGE-albumin급0.1 μg/mL、1 μg/mL、10 μg/mL적단삼다분산염저、중、고제량조;가입200μg/mL미경수식백단백적대조조.채용Annexin V/PI쌍염법검측만기EPCs조망;ECMatirx-gel검측만기EPCs형성신생혈관적능력.채용RT-PCR법검측세포중당기화종산물수체(the receptor for AGE,RAGE)、내피형일양화담합매(endothelial nitric oxide synthase,eNOS)mRNA수평;Western blot법검측RAGE、eNOS급단백격매Akt적단백표체수평.결과 여대조조비교,AGE조AnnexinV+/PI-세포비례증가,재ECMatirx-gel상형성신생혈관능력강저;만기EPCs중rage mRNA급RAGE단백표체증가,enos mRNA급eNOS급Akt단백표체감소.단삼다분산염1.0、10.0 μg/mL조,여AGE조비교,만기EPCs조망명현감소(P<0.05,P<0.01),재ECMatirx-gel상형성신생혈관능력증가(P<0.01),만기EPCs중RAGE표체감소(P<0.05,P<0.01),eNOS、Akt표체증가(P<0.05);여대조조비교,단삼다분산염10μg/mL조대만기EPCs조망급재ECMatirx-gel상형성신생혈관능력,rage mRNA급RAGE,enos mRNA급eNOS,Akt단백표체,차이균무통계학의의(P>0.05).결론 AGE사EPCs공능수손,표현위조망증가、천이급체외형성신생혈관적능력하강,단삼다분산염가수복유AGE-albumin인기적EPCs공능손해.
