CAJ | 학술논문

取18日龄的SPF鸡胚,分别采用组织块培养法、胰蛋白酶、胶原酶Ⅰ和嗜热菌蛋白酶消化法分离和体外培养小肠上皮细胞.结果表明:组织块培养法所获得的上皮细胞纯度较低；胰蛋白酶消化后多为单细胞,细胞贴壁和生长能力较弱；胶原酶Ⅰ单独消化50 min或嗜热菌蛋白酶单独消化110 min以及胶原酶Ⅰ、嗜热菌蛋白酶联合消化后均可得到大量隐窝细胞团块,经低速离心去除单细胞、差速贴壁除去成纤维细胞,可获得较纯的上皮细胞.分离的细胞接种培养12 ～24 h贴壁,48～ 72 h细胞团中的细胞向四周蔓延,形成一群群的细胞集落,6～7d细胞汇合成片,成“铺路石样”,细胞多呈扁平多角状,椭圆状,单层生长,边界清晰,互不重叠.经形态学观察、扫描电镜鉴定、碱性磷酸酶染色和免疫组化鉴定为上皮细胞.
취18일령적SPF계배,분별채용조직괴배양법、이단백매、효원매Ⅰ화기열균단백매소화법분리화체외배양소장상피세포.결과표명:조직괴배양법소획득적상피세포순도교저；이단백매소화후다위단세포,세포첩벽화생장능력교약；효원매Ⅰ단독소화50 min혹기열균단백매단독소화110 min이급효원매Ⅰ、기열균단백매연합소화후균가득도대량은와세포단괴,경저속리심거제단세포、차속첩벽제거성섬유세포,가획득교순적상피세포.분리적세포접충배양12 ～24 h첩벽,48～ 72 h세포단중적세포향사주만연,형성일군군적세포집락,6～7d세포회합성편,성“포로석양”,세포다정편평다각상,타원상,단층생장,변계청석,호불중첩.경형태학관찰、소묘전경감정、감성린산매염색화면역조화감정위상피세포.