西北农林科技大学学报（自然科学版）
西北農林科技大學學報（自然科學版）
서북농림과기대학학보（자연과학판）
JOURNAL OF NORTHWEST SCI-TECH UNIVERSITY OF AGRICULTURE AND FORESTRY(NATURAL SCIENCE EDITION)
2005年
4期
1-4,8
,共5页
许信刚%胡建和%张彦明%邓宏魁
許信剛%鬍建和%張彥明%鄧宏魁
허신강%호건화%장언명%산굉괴
丙型肝炎病毒%囊膜蛋白%基因疫苗%体液免疫应答
丙型肝炎病毒%囊膜蛋白%基因疫苗%體液免疫應答
병형간염병독%낭막단백%기인역묘%체액면역응답
将丙型肝炎病毒(HCV)H77株全长囊膜蛋白基因克隆到真核表达载体pcDNA4.0的CMV启动子下游,采用磷酸钙转染法将重组质粒转入293T细胞,用流式细胞仪检测细胞瞬时表达的目的蛋白.将构建的重组质粒肌注BALB/c小鼠,用表达HCV囊膜蛋白的SP2/0细胞作为抗原,用流式细胞仪检测小鼠血清HCV囊膜蛋白抗体.再用原核系统表达的E2蛋白作为抗原,Western Blot检测免疫小鼠血清抗体.试验结果显示,囊膜蛋白E1E2在293T细胞膜上进行了瞬时表达,基因疫苗免疫小鼠后产生了抗HCV囊膜蛋白的抗体,该抗体能与表达HCV囊膜蛋白的SP2/0细胞特异性结合,Western Blot表明该抗体也能与原核系统表达的E2蛋白结合.
將丙型肝炎病毒(HCV)H77株全長囊膜蛋白基因剋隆到真覈錶達載體pcDNA4.0的CMV啟動子下遊,採用燐痠鈣轉染法將重組質粒轉入293T細胞,用流式細胞儀檢測細胞瞬時錶達的目的蛋白.將構建的重組質粒肌註BALB/c小鼠,用錶達HCV囊膜蛋白的SP2/0細胞作為抗原,用流式細胞儀檢測小鼠血清HCV囊膜蛋白抗體.再用原覈繫統錶達的E2蛋白作為抗原,Western Blot檢測免疫小鼠血清抗體.試驗結果顯示,囊膜蛋白E1E2在293T細胞膜上進行瞭瞬時錶達,基因疫苗免疫小鼠後產生瞭抗HCV囊膜蛋白的抗體,該抗體能與錶達HCV囊膜蛋白的SP2/0細胞特異性結閤,Western Blot錶明該抗體也能與原覈繫統錶達的E2蛋白結閤.
장병형간염병독(HCV)H77주전장낭막단백기인극륭도진핵표체재체pcDNA4.0적CMV계동자하유,채용린산개전염법장중조질립전입293T세포,용류식세포의검측세포순시표체적목적단백.장구건적중조질립기주BALB/c소서,용표체HCV낭막단백적SP2/0세포작위항원,용류식세포의검측소서혈청HCV낭막단백항체.재용원핵계통표체적E2단백작위항원,Western Blot검측면역소서혈청항체.시험결과현시,낭막단백E1E2재293T세포막상진행료순시표체,기인역묘면역소서후산생료항HCV낭막단백적항체,해항체능여표체HCV낭막단백적SP2/0세포특이성결합,Western Blot표명해항체야능여원핵계통표체적E2단백결합.
