中国现代医学杂志
中國現代醫學雜誌
중국현대의학잡지
CHINA JOURNAL OF MODERN MEDICINE
2005年
23期
3556-3558
,共3页
刘启才%方嬿%李晓艳%柳息洪%曾益新
劉啟纔%方嬿%李曉豔%柳息洪%曾益新
류계재%방연%리효염%류식홍%증익신
NP9蛋白%原核表达%蛋白纯化
NP9蛋白%原覈錶達%蛋白純化
NP9단백%원핵표체%단백순화
目的构建表达人NP9融合蛋白的重组体并进行融合蛋白的原核表达及NP9蛋白的分离和纯化.方法通过聚合酶链反应(PCR)得到NP9基因的编码区序列,克隆到原核表达载体pGEX-6P-3上构建重组NP9原核表达质粒.转化大肠杆菌后通过SDS-PAGE电泳和Western blotting鉴定融合蛋白表达.使用GST FF层析柱分离纯化NP9蛋白.结果得到序列正确的NP9基因及重组原核表达质粒pGEX-6P-3-NP9,SDS-PAGE电泳和Western blotting证实重组质粒能够在大肠杆菌内受IPTG诱导表达,层析分离得到分子量为大约14kDa单一的NP9蛋白.结论成功构建了表达NP9融合蛋白的原核表达载体,该载体能在细菌内表达出GST-NP9融合蛋白,有效分离得到NP9蛋白.
目的構建錶達人NP9融閤蛋白的重組體併進行融閤蛋白的原覈錶達及NP9蛋白的分離和純化.方法通過聚閤酶鏈反應(PCR)得到NP9基因的編碼區序列,剋隆到原覈錶達載體pGEX-6P-3上構建重組NP9原覈錶達質粒.轉化大腸桿菌後通過SDS-PAGE電泳和Western blotting鑒定融閤蛋白錶達.使用GST FF層析柱分離純化NP9蛋白.結果得到序列正確的NP9基因及重組原覈錶達質粒pGEX-6P-3-NP9,SDS-PAGE電泳和Western blotting證實重組質粒能夠在大腸桿菌內受IPTG誘導錶達,層析分離得到分子量為大約14kDa單一的NP9蛋白.結論成功構建瞭錶達NP9融閤蛋白的原覈錶達載體,該載體能在細菌內錶達齣GST-NP9融閤蛋白,有效分離得到NP9蛋白.
목적구건표체인NP9융합단백적중조체병진행융합단백적원핵표체급NP9단백적분리화순화.방법통과취합매련반응(PCR)득도NP9기인적편마구서렬,극륭도원핵표체재체pGEX-6P-3상구건중조NP9원핵표체질립.전화대장간균후통과SDS-PAGE전영화Western blotting감정융합단백표체.사용GST FF층석주분리순화NP9단백.결과득도서렬정학적NP9기인급중조원핵표체질립pGEX-6P-3-NP9,SDS-PAGE전영화Western blotting증실중조질립능구재대장간균내수IPTG유도표체,층석분리득도분자량위대약14kDa단일적NP9단백.결론성공구건료표체NP9융합단백적원핵표체재체,해재체능재세균내표체출GST-NP9융합단백,유효분리득도NP9단백.
