中南大学学报（医学版）
中南大學學報（醫學版）
중남대학학보（의학판）
JOURNAL OF CENTRAL SOUTH UNIVERSITY (MEDICAL SCIENCES)
2006年
5期
742-746
,共5页
刘惠宁%邹望远%杨勇%王锷%李准民%刘庚勋
劉惠寧%鄒望遠%楊勇%王鍔%李準民%劉庚勛
류혜저%추망원%양용%왕악%리준민%류경훈
疱疹病毒Ⅰ型%脑啡肽%疼痛%基因治疗%神经元
皰疹病毒Ⅰ型%腦啡肽%疼痛%基因治療%神經元
포진병독Ⅰ형%뇌배태%동통%기인치료%신경원
目的:大鼠鞘内注射介导人前脑啡肽原基因(HPPE)单纯疱疹病毒Ⅰ型(HSV-Ⅰ)扩增子载体,观察LacZ和HPPE在脊髓神经元细胞中的共表达及对甲醛炎性痛的镇痛效应.方法:纯种雄性SD大鼠随机分为pHSVIRES-HPPE-LacZ载体组(SHPZ),pHSVIRES -LacZ空白载体组(SHZ),生理盐水组(NS),又分为分别注射SHPZ,SHZ和NS后3 d,1周,2周,3周,4周,5周时观察镇痛效应组,并对1周组观察HPPE转染表达,每组6只.采用改良Yaksh法对大鼠进行鞘内置管后,将构建好的含HPPE的重组单纯疱疹病毒I型扩增子载体注入大鼠鞘内,通过X-gal染色原位检测报告基因LacZ的表达,逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)方法检测HPPE的表达,放射免疫法检测脊髓组织脑啡肽浓度,并观察转染含HPPE基因载体对大鼠甲醛炎性疼痛的镇痛效应.结果:pHSVIRES-HPPE-LacZ在体感染大鼠中枢神经细胞后,用X-gal染色、RT-PCR和放射免疫检测方法均证实外源脑啡肽基因能有效表达.对甲醛诱发的炎性疼痛中,疼痛加权评分(PIS)于1周,2周,3周,4周时在第1相和第2相与对照组比较有显著差异,于第5周时第2相PIS接近对照组,对甲醛的镇痛效应可被鞘内注射纳洛酮拮抗. 结论: SHPZ能成功地将外源HPPE转染到脊髓神经元细胞中,使之有效表达,提示扩增子载体SHPZ是良好的慢性疼痛转基因治疗工具;HPPE的表达产物可对甲醛炎性痛产生镇痛效应.
目的:大鼠鞘內註射介導人前腦啡肽原基因(HPPE)單純皰疹病毒Ⅰ型(HSV-Ⅰ)擴增子載體,觀察LacZ和HPPE在脊髓神經元細胞中的共錶達及對甲醛炎性痛的鎮痛效應.方法:純種雄性SD大鼠隨機分為pHSVIRES-HPPE-LacZ載體組(SHPZ),pHSVIRES -LacZ空白載體組(SHZ),生理鹽水組(NS),又分為分彆註射SHPZ,SHZ和NS後3 d,1週,2週,3週,4週,5週時觀察鎮痛效應組,併對1週組觀察HPPE轉染錶達,每組6隻.採用改良Yaksh法對大鼠進行鞘內置管後,將構建好的含HPPE的重組單純皰疹病毒I型擴增子載體註入大鼠鞘內,通過X-gal染色原位檢測報告基因LacZ的錶達,逆轉錄聚閤酶鏈式反應(RT-PCR)方法檢測HPPE的錶達,放射免疫法檢測脊髓組織腦啡肽濃度,併觀察轉染含HPPE基因載體對大鼠甲醛炎性疼痛的鎮痛效應.結果:pHSVIRES-HPPE-LacZ在體感染大鼠中樞神經細胞後,用X-gal染色、RT-PCR和放射免疫檢測方法均證實外源腦啡肽基因能有效錶達.對甲醛誘髮的炎性疼痛中,疼痛加權評分(PIS)于1週,2週,3週,4週時在第1相和第2相與對照組比較有顯著差異,于第5週時第2相PIS接近對照組,對甲醛的鎮痛效應可被鞘內註射納洛酮拮抗. 結論: SHPZ能成功地將外源HPPE轉染到脊髓神經元細胞中,使之有效錶達,提示擴增子載體SHPZ是良好的慢性疼痛轉基因治療工具;HPPE的錶達產物可對甲醛炎性痛產生鎮痛效應.
목적:대서초내주사개도인전뇌배태원기인(HPPE)단순포진병독Ⅰ형(HSV-Ⅰ)확증자재체,관찰LacZ화HPPE재척수신경원세포중적공표체급대갑철염성통적진통효응.방법:순충웅성SD대서수궤분위pHSVIRES-HPPE-LacZ재체조(SHPZ),pHSVIRES -LacZ공백재체조(SHZ),생리염수조(NS),우분위분별주사SHPZ,SHZ화NS후3 d,1주,2주,3주,4주,5주시관찰진통효응조,병대1주조관찰HPPE전염표체,매조6지.채용개량Yaksh법대대서진행초내치관후,장구건호적함HPPE적중조단순포진병독I형확증자재체주입대서초내,통과X-gal염색원위검측보고기인LacZ적표체,역전록취합매련식반응(RT-PCR)방법검측HPPE적표체,방사면역법검측척수조직뇌배태농도,병관찰전염함HPPE기인재체대대서갑철염성동통적진통효응.결과:pHSVIRES-HPPE-LacZ재체감염대서중추신경세포후,용X-gal염색、RT-PCR화방사면역검측방법균증실외원뇌배태기인능유효표체.대갑철유발적염성동통중,동통가권평분(PIS)우1주,2주,3주,4주시재제1상화제2상여대조조비교유현저차이,우제5주시제2상PIS접근대조조,대갑철적진통효응가피초내주사납락동길항. 결론: SHPZ능성공지장외원HPPE전염도척수신경원세포중,사지유효표체,제시확증자재체SHPZ시량호적만성동통전기인치료공구;HPPE적표체산물가대갑철염성통산생진통효응.
