热带医学杂志
熱帶醫學雜誌
열대의학잡지
JOURNAL OF TROPICAL MEDICINE
2007年
1期
30-33
,共4页
SARS-CoV%Spike蛋白%定点诱变
SARS-CoV%Spike蛋白%定點誘變
SARS-CoV%Spike단백%정점유변
目的 分析确定SARS-CoV Spike蛋白序列中对SARS-CoV的感染能力相关性较强的位点,并进行定点诱变.方法 比对不同来源株SARS-CoV的Spike蛋白的序列,计算其相应位点的突变墒值和突变几率,结合进一步的生物信息学分析,筛选出经预测可能影响Spike蛋白与其受体结合进而导致SARS病毒对宿主细胞的膜融合侵染能力的7个位点,对各个位点用重叠延伸PCR法或直接PCR法进行人工定点诱变,获7个突变片段,之后将各片段亚克隆至克隆载体PSP72中.结果 经PCR和测序确认各片段点突变成功,并正确插入克隆载体PSP72中.结论 成功实施Spike蛋白的定点诱变,获得7个突变片段的重组子,这些突变体可为研究这些突变位点在Spike蛋白与受体结合中的意义,进而可为阐述Spike蛋白的结构与功能的关系、揭示Spike蛋白变异与SARS病毒侵入(染)细胞能力的相关性提供坚实的实验基础.
目的 分析確定SARS-CoV Spike蛋白序列中對SARS-CoV的感染能力相關性較彊的位點,併進行定點誘變.方法 比對不同來源株SARS-CoV的Spike蛋白的序列,計算其相應位點的突變墑值和突變幾率,結閤進一步的生物信息學分析,篩選齣經預測可能影響Spike蛋白與其受體結閤進而導緻SARS病毒對宿主細胞的膜融閤侵染能力的7箇位點,對各箇位點用重疊延伸PCR法或直接PCR法進行人工定點誘變,穫7箇突變片段,之後將各片段亞剋隆至剋隆載體PSP72中.結果 經PCR和測序確認各片段點突變成功,併正確插入剋隆載體PSP72中.結論 成功實施Spike蛋白的定點誘變,穫得7箇突變片段的重組子,這些突變體可為研究這些突變位點在Spike蛋白與受體結閤中的意義,進而可為闡述Spike蛋白的結構與功能的關繫、揭示Spike蛋白變異與SARS病毒侵入(染)細胞能力的相關性提供堅實的實驗基礎.
목적 분석학정SARS-CoV Spike단백서렬중대SARS-CoV적감염능력상관성교강적위점,병진행정점유변.방법 비대불동래원주SARS-CoV적Spike단백적서렬,계산기상응위점적돌변상치화돌변궤솔,결합진일보적생물신식학분석,사선출경예측가능영향Spike단백여기수체결합진이도치SARS병독대숙주세포적막융합침염능력적7개위점,대각개위점용중첩연신PCR법혹직접PCR법진행인공정점유변,획7개돌변편단,지후장각편단아극륭지극륭재체PSP72중.결과 경PCR화측서학인각편단점돌변성공,병정학삽입극륭재체PSP72중.결론 성공실시Spike단백적정점유변,획득7개돌변편단적중조자,저사돌변체가위연구저사돌변위점재Spike단백여수체결합중적의의,진이가위천술Spike단백적결구여공능적관계、게시Spike단백변이여SARS병독침입(염)세포능력적상관성제공견실적실험기출.
