现代检验医学杂志
現代檢驗醫學雜誌
현대검험의학잡지
JOURNAL OF MODERN LABORATORY MEDICINE
2008年
5期
18-20
,共3页
聚合酶链反应-单链构象多态性%ropB基因%药物耐受性%结核分枝杆菌
聚閤酶鏈反應-單鏈構象多態性%ropB基因%藥物耐受性%結覈分枝桿菌
취합매련반응-단련구상다태성%ropB기인%약물내수성%결핵분지간균
目的 探讨PCR-SSCP技术检测结核分枝杆菌耐利福平rpoB基因作为新的分子药敏试验方法的价值.方法 应用PCR-SSCP技术检测结核分枝杆菌耐利福平rpoB基因核心区的突变,同时对片段长度为215bp的PCR扩增产物进行测序分析.受试菌为23株利福平敏感结核分枝杆菌以及35株利福平抗性结核分枝杆菌.结果 23株利福平敏感结核分枝杆菌分别用PCR-SSCP和PCR扩增片段测序均没有检测到rpoB碱基突变.而在35株利福平抗性菌株中,PCR-SSCP检测到31株与H37Rv标准株不同的带谱,PCR-SSCP检测基因突变的敏感度和特异度分别为88.6%(31/35)和100%(23/23).对35株利福平抗性菌株PCR扩增产物进行测序分析,在其中32株中检出了基因突变.测序分析检测基因突变的敏感度和特异度分别为91.4%(32/35)和100%(23/23).卡方检验,PCR-SSCP和PCR扩增片段测序两种方法的敏感度之间没有显著性差异(P＞0.05).若以DNA测序为标准,则PCR-SSCP检测基因突变的准确度、敏感度和特异度分别为93.1%(54/58),96.9%(31/32)和100%(23/23).结论 PCR-SSCP检测结核分枝杆菌耐利福平rpoB基因突变可用于利福平药物敏感度的快速测定.
目的 探討PCR-SSCP技術檢測結覈分枝桿菌耐利福平rpoB基因作為新的分子藥敏試驗方法的價值.方法 應用PCR-SSCP技術檢測結覈分枝桿菌耐利福平rpoB基因覈心區的突變,同時對片段長度為215bp的PCR擴增產物進行測序分析.受試菌為23株利福平敏感結覈分枝桿菌以及35株利福平抗性結覈分枝桿菌.結果 23株利福平敏感結覈分枝桿菌分彆用PCR-SSCP和PCR擴增片段測序均沒有檢測到rpoB堿基突變.而在35株利福平抗性菌株中,PCR-SSCP檢測到31株與H37Rv標準株不同的帶譜,PCR-SSCP檢測基因突變的敏感度和特異度分彆為88.6%(31/35)和100%(23/23).對35株利福平抗性菌株PCR擴增產物進行測序分析,在其中32株中檢齣瞭基因突變.測序分析檢測基因突變的敏感度和特異度分彆為91.4%(32/35)和100%(23/23).卡方檢驗,PCR-SSCP和PCR擴增片段測序兩種方法的敏感度之間沒有顯著性差異(P＞0.05).若以DNA測序為標準,則PCR-SSCP檢測基因突變的準確度、敏感度和特異度分彆為93.1%(54/58),96.9%(31/32)和100%(23/23).結論 PCR-SSCP檢測結覈分枝桿菌耐利福平rpoB基因突變可用于利福平藥物敏感度的快速測定.
목적 탐토PCR-SSCP기술검측결핵분지간균내리복평rpoB기인작위신적분자약민시험방법적개치.방법 응용PCR-SSCP기술검측결핵분지간균내리복평rpoB기인핵심구적돌변,동시대편단장도위215bp적PCR확증산물진행측서분석.수시균위23주리복평민감결핵분지간균이급35주리복평항성결핵분지간균.결과 23주리복평민감결핵분지간균분별용PCR-SSCP화PCR확증편단측서균몰유검측도rpoB감기돌변.이재35주리복평항성균주중,PCR-SSCP검측도31주여H37Rv표준주불동적대보,PCR-SSCP검측기인돌변적민감도화특이도분별위88.6%(31/35)화100%(23/23).대35주리복평항성균주PCR확증산물진행측서분석,재기중32주중검출료기인돌변.측서분석검측기인돌변적민감도화특이도분별위91.4%(32/35)화100%(23/23).잡방검험,PCR-SSCP화PCR확증편단측서량충방법적민감도지간몰유현저성차이(P＞0.05).약이DNA측서위표준,칙PCR-SSCP검측기인돌변적준학도、민감도화특이도분별위93.1%(54/58),96.9%(31/32)화100%(23/23).결론 PCR-SSCP검측결핵분지간균내리복평rpoB기인돌변가용우리복평약물민감도적쾌속측정.
