中国免疫学杂志
中國免疫學雜誌
중국면역학잡지
CHINESE JOURNAL OF IMMUNOLOGY
2009年
3期
243-246
,共4页
黄志刚%郜恒骏%陈锡美%胡莺%张小燕%孟逊
黃誌剛%郜恆駿%陳錫美%鬍鶯%張小燕%孟遜
황지강%고항준%진석미%호앵%장소연%맹손
Argonaute3蛋白%多克隆抗体%组织芯片
Argonaute3蛋白%多剋隆抗體%組織芯片
Argonaute3단백%다극륭항체%조직심편
目的:制备兔抗人Argonaute3(AGO3)的多克隆抗体,并鉴定其特异性,应用组织芯片初步探讨其在人类正常及肿瘤组织中的分布.方法:合成特异性AGO3多肽,以马来酰胺活化匙孔血蓝蛋白(KLH)作为载体构建多肽免疫原,通过致敏大白兔,制备兔抗人AGO3多克隆抗体,然后用亲和层析法纯化抗体.用ELISA和Western方法进行抗体验证,并应用人组织芯片进行AGO3的免疫组化研究.结果:通过构建AGO3多肽-KLH载体复合物致敏大白兔,我们制备了兔抗人AGO3蛋白多克隆抗体,末次抗血清效价为l:20 000,经ELISA及Western blot证实兔抗人AGO3抗体可特异性识别AGO3多肽,在人组织芯片中通过免疫组化染色显示该抗体在很多正常组织上皮细胞及肿瘤细胞胞浆中呈阳性染色.结论:本项研究成功制备兔抗人AGO3多克隆抗体,为进一步研究AGO3在微小RNA/RNA干扰通路中的作用及在人类疾病中的意义提供了有利工具.
目的:製備兔抗人Argonaute3(AGO3)的多剋隆抗體,併鑒定其特異性,應用組織芯片初步探討其在人類正常及腫瘤組織中的分佈.方法:閤成特異性AGO3多肽,以馬來酰胺活化匙孔血藍蛋白(KLH)作為載體構建多肽免疫原,通過緻敏大白兔,製備兔抗人AGO3多剋隆抗體,然後用親和層析法純化抗體.用ELISA和Western方法進行抗體驗證,併應用人組織芯片進行AGO3的免疫組化研究.結果:通過構建AGO3多肽-KLH載體複閤物緻敏大白兔,我們製備瞭兔抗人AGO3蛋白多剋隆抗體,末次抗血清效價為l:20 000,經ELISA及Western blot證實兔抗人AGO3抗體可特異性識彆AGO3多肽,在人組織芯片中通過免疫組化染色顯示該抗體在很多正常組織上皮細胞及腫瘤細胞胞漿中呈暘性染色.結論:本項研究成功製備兔抗人AGO3多剋隆抗體,為進一步研究AGO3在微小RNA/RNA榦擾通路中的作用及在人類疾病中的意義提供瞭有利工具.
목적:제비토항인Argonaute3(AGO3)적다극륭항체,병감정기특이성,응용조직심편초보탐토기재인류정상급종류조직중적분포.방법:합성특이성AGO3다태,이마래선알활화시공혈람단백(KLH)작위재체구건다태면역원,통과치민대백토,제비토항인AGO3다극륭항체,연후용친화층석법순화항체.용ELISA화Western방법진행항체험증,병응용인조직심편진행AGO3적면역조화연구.결과:통과구건AGO3다태-KLH재체복합물치민대백토,아문제비료토항인AGO3단백다극륭항체,말차항혈청효개위l:20 000,경ELISA급Western blot증실토항인AGO3항체가특이성식별AGO3다태,재인조직심편중통과면역조화염색현시해항체재흔다정상조직상피세포급종류세포포장중정양성염색.결론:본항연구성공제비토항인AGO3다극륭항체,위진일보연구AGO3재미소RNA/RNA간우통로중적작용급재인류질병중적의의제공료유리공구.
