昆明医学院学报
昆明醫學院學報
곤명의학원학보
ACADEMIC JOURNAL OF KUNMING MEDICAL COLLEGE
2010年
11期
30-36
,共7页
龚翊%龙琼先%杨芳%李俊%黄芸%高建鹏
龔翊%龍瓊先%楊芳%李俊%黃蕓%高建鵬
공익%룡경선%양방%리준%황예%고건붕
间充质干细胞%肝细胞%诱导分化
間充質榦細胞%肝細胞%誘導分化
간충질간세포%간세포%유도분화
目的 比较目前常用的诱导因素诱导MSCs分化为肝细胞的效果,以探讨大鼠骨髓MSCs向肝细胞方向分化的最佳诱导条件.方法 无菌条件下取成年大鼠四肢骨骨髓分离出骨髓来源的间充质干细胞(marrow mesenchymal stem cells,MSCs).在培养液中分别添加不同量的干细胞因子(SCF)、肝细胞生长因子(HGF)、成纤维生长因子-4(FGF-4)和不同组合的细胞因子以及不同量的肝细胞提取液,诱导MSCs向肝细胞方向分化,以未加任何诱导因素的培养液作为对照组,观察诱导细胞的形态学变化,并且应用生化检测诱导培养液上清中白蛋白和尿素的产生量,免疫组化检测分化后细胞的细胞角蛋白-18(CK18)的表达,并观察分化后细胞吲哚靛青绿(1CG)的摄入情况.结果 诱导分化后的细胞呈圆形或多角形,类似肝细胞形态.未加任何诱导因素的培养细胞仍旧呈长梭形.不同用量的单一SCF、HGF和FGF-4、不同组合的细胞因子以及不同用量的肝细胞提取液均能诱导MSCs向肝细胞方向分化,但肝细胞提取液(1.0 mg/mL)组的诱导效果最佳.各诱导培养上清液中均有不同量的白蛋白和尿素的产生,诱导分化后细胞均见不同程度CK18的表达,并见分化后细胞不同程度的摄入ICG.未加任何诱导因素的细胞培养上清液中未见白蛋白和尿素产生,细胞不表达CK18,同时不能摄入ICG.结论 细胞因子(SCF、HGF、FGF-4)和肝细胞提取液均能诱导MSCs向肝细胞方向分化,其中肝细胞提取液的诱导效果最佳.
目的 比較目前常用的誘導因素誘導MSCs分化為肝細胞的效果,以探討大鼠骨髓MSCs嚮肝細胞方嚮分化的最佳誘導條件.方法 無菌條件下取成年大鼠四肢骨骨髓分離齣骨髓來源的間充質榦細胞(marrow mesenchymal stem cells,MSCs).在培養液中分彆添加不同量的榦細胞因子(SCF)、肝細胞生長因子(HGF)、成纖維生長因子-4(FGF-4)和不同組閤的細胞因子以及不同量的肝細胞提取液,誘導MSCs嚮肝細胞方嚮分化,以未加任何誘導因素的培養液作為對照組,觀察誘導細胞的形態學變化,併且應用生化檢測誘導培養液上清中白蛋白和尿素的產生量,免疫組化檢測分化後細胞的細胞角蛋白-18(CK18)的錶達,併觀察分化後細胞吲哚靛青綠(1CG)的攝入情況.結果 誘導分化後的細胞呈圓形或多角形,類似肝細胞形態.未加任何誘導因素的培養細胞仍舊呈長梭形.不同用量的單一SCF、HGF和FGF-4、不同組閤的細胞因子以及不同用量的肝細胞提取液均能誘導MSCs嚮肝細胞方嚮分化,但肝細胞提取液(1.0 mg/mL)組的誘導效果最佳.各誘導培養上清液中均有不同量的白蛋白和尿素的產生,誘導分化後細胞均見不同程度CK18的錶達,併見分化後細胞不同程度的攝入ICG.未加任何誘導因素的細胞培養上清液中未見白蛋白和尿素產生,細胞不錶達CK18,同時不能攝入ICG.結論 細胞因子(SCF、HGF、FGF-4)和肝細胞提取液均能誘導MSCs嚮肝細胞方嚮分化,其中肝細胞提取液的誘導效果最佳.
목적 비교목전상용적유도인소유도MSCs분화위간세포적효과,이탐토대서골수MSCs향간세포방향분화적최가유도조건.방법 무균조건하취성년대서사지골골수분리출골수래원적간충질간세포(marrow mesenchymal stem cells,MSCs).재배양액중분별첨가불동량적간세포인자(SCF)、간세포생장인자(HGF)、성섬유생장인자-4(FGF-4)화불동조합적세포인자이급불동량적간세포제취액,유도MSCs향간세포방향분화,이미가임하유도인소적배양액작위대조조,관찰유도세포적형태학변화,병차응용생화검측유도배양액상청중백단백화뇨소적산생량,면역조화검측분화후세포적세포각단백-18(CK18)적표체,병관찰분화후세포신타전청록(1CG)적섭입정황.결과 유도분화후적세포정원형혹다각형,유사간세포형태.미가임하유도인소적배양세포잉구정장사형.불동용량적단일SCF、HGF화FGF-4、불동조합적세포인자이급불동용량적간세포제취액균능유도MSCs향간세포방향분화,단간세포제취액(1.0 mg/mL)조적유도효과최가.각유도배양상청액중균유불동량적백단백화뇨소적산생,유도분화후세포균견불동정도CK18적표체,병견분화후세포불동정도적섭입ICG.미가임하유도인소적세포배양상청액중미견백단백화뇨소산생,세포불표체CK18,동시불능섭입ICG.결론 세포인자(SCF、HGF、FGF-4)화간세포제취액균능유도MSCs향간세포방향분화,기중간세포제취액적유도효과최가.