新医学
新醫學
신의학
NEW CHINESE MEDICINE
2011年
7期
433-435,封3
,共4页
骆宁%范瑾瑾%董秀清%余学清
駱寧%範瑾瑾%董秀清%餘學清
락저%범근근%동수청%여학청
盖玻片%激光共聚焦显微镜%免疫荧光
蓋玻片%激光共聚焦顯微鏡%免疫熒光
개파편%격광공취초현미경%면역형광
目的:探讨两种盖玻片制备的细胞爬片对激光共聚焦扫描显微镜(Confocal laser scanning microscopy,CLSM)采集免疫荧光图像效果的影响.方法:以适用于CLSM的专用盖玻片(A片)和组织病理学通用的普通盖玻片(B片)制备肾小管上皮细胞NRK52E的细胞爬片,分别进行胞浆蛋白转录激活因子3(STAT3),胞膜蛋白上皮型钙黏附蛋白(E-cadherin )及细胞骨架蛋白纤维状肌动蛋白(F-actin )的免疫荧光染色,在CLSM下以相同设置采集荧光图像并观察结果的异同.结果:CLSM图像显示,A片中胞浆蛋白STAT3弥散分布于胞浆,胞膜蛋白E-cadherin沿细胞连接处连续线状分布,细胞骨架蛋白F-actin向细胞表面伸出毛刺状突起的丝状伪足,均真实反映了蛋白的全部分布;而B片中胞浆蛋白STAT3弥散分布于胞浆,胞膜蛋白E-cadherin在细胞连接处呈不连续的点、短线状分布,细胞骨架蛋白F-actin未显示向细胞表面伸出的丝状伪足,不能完全真实反映蛋白的全部分布.结论:普通组织病理盖玻片用于CLSM的荧光图像观察,有时会使研究工作者在分析荧光图像时得出错误的结论,因此要选择适合CLSM的免疫荧光专用盖玻片,使实验条件趋于标准化.
目的:探討兩種蓋玻片製備的細胞爬片對激光共聚焦掃描顯微鏡(Confocal laser scanning microscopy,CLSM)採集免疫熒光圖像效果的影響.方法:以適用于CLSM的專用蓋玻片(A片)和組織病理學通用的普通蓋玻片(B片)製備腎小管上皮細胞NRK52E的細胞爬片,分彆進行胞漿蛋白轉錄激活因子3(STAT3),胞膜蛋白上皮型鈣黏附蛋白(E-cadherin )及細胞骨架蛋白纖維狀肌動蛋白(F-actin )的免疫熒光染色,在CLSM下以相同設置採集熒光圖像併觀察結果的異同.結果:CLSM圖像顯示,A片中胞漿蛋白STAT3瀰散分佈于胞漿,胞膜蛋白E-cadherin沿細胞連接處連續線狀分佈,細胞骨架蛋白F-actin嚮細胞錶麵伸齣毛刺狀突起的絲狀偽足,均真實反映瞭蛋白的全部分佈;而B片中胞漿蛋白STAT3瀰散分佈于胞漿,胞膜蛋白E-cadherin在細胞連接處呈不連續的點、短線狀分佈,細胞骨架蛋白F-actin未顯示嚮細胞錶麵伸齣的絲狀偽足,不能完全真實反映蛋白的全部分佈.結論:普通組織病理蓋玻片用于CLSM的熒光圖像觀察,有時會使研究工作者在分析熒光圖像時得齣錯誤的結論,因此要選擇適閤CLSM的免疫熒光專用蓋玻片,使實驗條件趨于標準化.
목적:탐토량충개파편제비적세포파편대격광공취초소묘현미경(Confocal laser scanning microscopy,CLSM)채집면역형광도상효과적영향.방법:이괄용우CLSM적전용개파편(A편)화조직병이학통용적보통개파편(B편)제비신소관상피세포NRK52E적세포파편,분별진행포장단백전록격활인자3(STAT3),포막단백상피형개점부단백(E-cadherin )급세포골가단백섬유상기동단백(F-actin )적면역형광염색,재CLSM하이상동설치채집형광도상병관찰결과적이동.결과:CLSM도상현시,A편중포장단백STAT3미산분포우포장,포막단백E-cadherin연세포련접처련속선상분포,세포골가단백F-actin향세포표면신출모자상돌기적사상위족,균진실반영료단백적전부분포;이B편중포장단백STAT3미산분포우포장,포막단백E-cadherin재세포련접처정불련속적점、단선상분포,세포골가단백F-actin미현시향세포표면신출적사상위족,불능완전진실반영단백적전부분포.결론:보통조직병리개파편용우CLSM적형광도상관찰,유시회사연구공작자재분석형광도상시득출착오적결론,인차요선택괄합CLSM적면역형광전용개파편,사실험조건추우표준화.
