中国预防兽医学报
中國預防獸醫學報
중국예방수의학보
CHINESE JOURNAL OF PREVENTIVE VETERINARY MEDICINE
2012年
9期
746-748
,共3页
李军星%王一成%袁秀芳%徐丽华%曹会敏%申世川%张鲁滨
李軍星%王一成%袁秀芳%徐麗華%曹會敏%申世川%張魯濱
리군성%왕일성%원수방%서려화%조회민%신세천%장로빈
副猪嗜血杆菌%重组CDT亚基%原核表达%抗原性
副豬嗜血桿菌%重組CDT亞基%原覈錶達%抗原性
부저기혈간균%중조CDT아기%원핵표체%항원성
为原核表达副猪嗜血杆菌(H.parasuis) CDT毒素并检测其在体外培养时的分泌表达情况,本实验将切除信号肽的CDT毒素的3个亚基基因分别克隆于pET-28a载体中在大肠杆菌进行表达,并将重组蛋白经亲和层析纯化后,免疫兔制备抗血清,用于鉴定H.parasuis体外培养时CDT分泌表达情况.结果表明CDT毒素3个亚基均在Rosetta菌株中得到表达,其中cdtB约为28.2 ku,符合预期大小,而cdtA和cdtC亚基比预期的23.5 ku和17.4 ku略大.表达的3个重组蛋白可以被自然感染猪血清识别,表明其具有良好的反应原性,同时也表明H.parasuis在猪体内定殖或感染过程中分泌CDT.制备的抗血清可以与体外培养H.parasuis的分泌蛋白中的CDT亚基反应,表明重组蛋白具有良好的免疫原性,同时也表明H.parasuis体外培养时也分泌CDT.
為原覈錶達副豬嗜血桿菌(H.parasuis) CDT毒素併檢測其在體外培養時的分泌錶達情況,本實驗將切除信號肽的CDT毒素的3箇亞基基因分彆剋隆于pET-28a載體中在大腸桿菌進行錶達,併將重組蛋白經親和層析純化後,免疫兔製備抗血清,用于鑒定H.parasuis體外培養時CDT分泌錶達情況.結果錶明CDT毒素3箇亞基均在Rosetta菌株中得到錶達,其中cdtB約為28.2 ku,符閤預期大小,而cdtA和cdtC亞基比預期的23.5 ku和17.4 ku略大.錶達的3箇重組蛋白可以被自然感染豬血清識彆,錶明其具有良好的反應原性,同時也錶明H.parasuis在豬體內定殖或感染過程中分泌CDT.製備的抗血清可以與體外培養H.parasuis的分泌蛋白中的CDT亞基反應,錶明重組蛋白具有良好的免疫原性,同時也錶明H.parasuis體外培養時也分泌CDT.
위원핵표체부저기혈간균(H.parasuis) CDT독소병검측기재체외배양시적분비표체정황,본실험장절제신호태적CDT독소적3개아기기인분별극륭우pET-28a재체중재대장간균진행표체,병장중조단백경친화층석순화후,면역토제비항혈청,용우감정H.parasuis체외배양시CDT분비표체정황.결과표명CDT독소3개아기균재Rosetta균주중득도표체,기중cdtB약위28.2 ku,부합예기대소,이cdtA화cdtC아기비예기적23.5 ku화17.4 ku략대.표체적3개중조단백가이피자연감염저혈청식별,표명기구유량호적반응원성,동시야표명H.parasuis재저체내정식혹감염과정중분비CDT.제비적항혈청가이여체외배양H.parasuis적분비단백중적CDT아기반응,표명중조단백구유량호적면역원성,동시야표명H.parasuis체외배양시야분비CDT.
