中国基层医药
中國基層醫藥
중국기층의약
CHINESE JOURNAL OF PRIMARY MEDICINE AND PHARMACY
2006年
4期
543-545
,共3页
陈杰%赵立子%邓颖%王雪丁%关溯%黄民
陳傑%趙立子%鄧穎%王雪丁%關溯%黃民
진걸%조립자%산영%왕설정%관소%황민
RNA干扰%细胞色素P450%基因表达%环磷酰胺%实验室技术和方法
RNA榦擾%細胞色素P450%基因錶達%環燐酰胺%實驗室技術和方法
RNA간우%세포색소P450%기인표체%배린선알%실험실기술화방법
目的研究质粒表达型短发夹RNA(small hairpin RNA,shRNA)对CHL-3A4转基因细胞的细胞色素P450 3A4(cytochrome P450 3A4,CYP3A4)基因表达的影响.方法设计并构建3条shRNA真核表达载体(CYP3A4Ⅰ、CYP3A4Ⅱ、CYP3A4Ⅲ),脂质体转染CHL-3A4转基因细胞.转染48 h后,TR-PCR和Western Blotting分别观察3条shRNA对CYP3A4mRNA和蛋白表达的影响;噻唑蓝(MTT)观察shRNA抑制环磷酰胺对CHL-3A4转基因细胞毒性作用.结果 CYP3A4Ⅲ表达载体的shRNA分别能抑制CHL-3A4细胞的CYP3A4mRNA表达(70%)及蛋白表达(75%),抑制环磷酰胺对CHL-3A4细胞(75%)细胞毒作用.结论 RNA干扰能显著抑制CYP3A4基因的表达,RNA干扰技术为肝细胞色素P450的研究提供了新的方法.
目的研究質粒錶達型短髮夾RNA(small hairpin RNA,shRNA)對CHL-3A4轉基因細胞的細胞色素P450 3A4(cytochrome P450 3A4,CYP3A4)基因錶達的影響.方法設計併構建3條shRNA真覈錶達載體(CYP3A4Ⅰ、CYP3A4Ⅱ、CYP3A4Ⅲ),脂質體轉染CHL-3A4轉基因細胞.轉染48 h後,TR-PCR和Western Blotting分彆觀察3條shRNA對CYP3A4mRNA和蛋白錶達的影響;噻唑藍(MTT)觀察shRNA抑製環燐酰胺對CHL-3A4轉基因細胞毒性作用.結果 CYP3A4Ⅲ錶達載體的shRNA分彆能抑製CHL-3A4細胞的CYP3A4mRNA錶達(70%)及蛋白錶達(75%),抑製環燐酰胺對CHL-3A4細胞(75%)細胞毒作用.結論 RNA榦擾能顯著抑製CYP3A4基因的錶達,RNA榦擾技術為肝細胞色素P450的研究提供瞭新的方法.
목적연구질립표체형단발협RNA(small hairpin RNA,shRNA)대CHL-3A4전기인세포적세포색소P450 3A4(cytochrome P450 3A4,CYP3A4)기인표체적영향.방법설계병구건3조shRNA진핵표체재체(CYP3A4Ⅰ、CYP3A4Ⅱ、CYP3A4Ⅲ),지질체전염CHL-3A4전기인세포.전염48 h후,TR-PCR화Western Blotting분별관찰3조shRNA대CYP3A4mRNA화단백표체적영향;새서람(MTT)관찰shRNA억제배린선알대CHL-3A4전기인세포독성작용.결과 CYP3A4Ⅲ표체재체적shRNA분별능억제CHL-3A4세포적CYP3A4mRNA표체(70%)급단백표체(75%),억제배린선알대CHL-3A4세포(75%)세포독작용.결론 RNA간우능현저억제CYP3A4기인적표체,RNA간우기술위간세포색소P450적연구제공료신적방법.
