基因组学与应用生物学
基因組學與應用生物學
기인조학여응용생물학
GENOMICS AND APPLIED BIOLOGY
2010年
3期
434-440
,共7页
莫德姣%刘君梁%冼亮%段承杰%冯家勋
莫德姣%劉君樑%冼亮%段承傑%馮傢勛
막덕교%류군량%승량%단승걸%풍가훈
曲霉%糖化酶%蛋白质纯化%酶学特性
麯黴%糖化酶%蛋白質純化%酶學特性
곡매%당화매%단백질순화%매학특성
本研究从广西花坪自然保护区采集的土壤中筛选获得了一株产糖化酶丝状真菌菌株57-45,通过形态学观察和真菌内转录间隔区(internal transcribed spacer,ITS)序列比对分析,将其初步鉴定为曲霉属(Aspergillus sp.)的一个种.纯化真菌57-45所产的一种胞外糖化酶经过硫酸铵分级沉淀、疏水层析和阴离子交换层析三步蛋白质纯化步骤,得到在SDS-PAGE上约60 kD的单一蛋白质条带,薄层层析分析表明该纯化的蛋白质水解可溶性淀粉的产物只有葡萄糖,证明该纯化的蛋白质为糖化酶.纯化的糖化酶Km值为1.9 mg/mL,Vmax为4148μmol/(min·mg),最适作用pH 5.5,最适作用温度50℃,在同步糖化发酵中有应用的潜力.金属离子Fe3+、Zn2+、Cu2+对酶活有较强的抑制作用,EDTA对酶活有较强的促进作用.本文结果将为进一步研究曲霉糖化酶的酶学特性提供新的材料.
本研究從廣西花坪自然保護區採集的土壤中篩選穫得瞭一株產糖化酶絲狀真菌菌株57-45,通過形態學觀察和真菌內轉錄間隔區(internal transcribed spacer,ITS)序列比對分析,將其初步鑒定為麯黴屬(Aspergillus sp.)的一箇種.純化真菌57-45所產的一種胞外糖化酶經過硫痠銨分級沉澱、疏水層析和陰離子交換層析三步蛋白質純化步驟,得到在SDS-PAGE上約60 kD的單一蛋白質條帶,薄層層析分析錶明該純化的蛋白質水解可溶性澱粉的產物隻有葡萄糖,證明該純化的蛋白質為糖化酶.純化的糖化酶Km值為1.9 mg/mL,Vmax為4148μmol/(min·mg),最適作用pH 5.5,最適作用溫度50℃,在同步糖化髮酵中有應用的潛力.金屬離子Fe3+、Zn2+、Cu2+對酶活有較彊的抑製作用,EDTA對酶活有較彊的促進作用.本文結果將為進一步研究麯黴糖化酶的酶學特性提供新的材料.
본연구종엄서화평자연보호구채집적토양중사선획득료일주산당화매사상진균균주57-45,통과형태학관찰화진균내전록간격구(internal transcribed spacer,ITS)서렬비대분석,장기초보감정위곡매속(Aspergillus sp.)적일개충.순화진균57-45소산적일충포외당화매경과류산안분급침정、소수층석화음리자교환층석삼보단백질순화보취,득도재SDS-PAGE상약60 kD적단일단백질조대,박층층석분석표명해순화적단백질수해가용성정분적산물지유포도당,증명해순화적단백질위당화매.순화적당화매Km치위1.9 mg/mL,Vmax위4148μmol/(min·mg),최괄작용pH 5.5,최괄작용온도50℃,재동보당화발효중유응용적잠력.금속리자Fe3+、Zn2+、Cu2+대매활유교강적억제작용,EDTA대매활유교강적촉진작용.본문결과장위진일보연구곡매당화매적매학특성제공신적재료.
