中国组织工程研究与临床康复
中國組織工程研究與臨床康複
중국조직공정연구여림상강복
JOURNAL OF CLINICAL REHABILITATIVE TISSUE ENGINEERING RESEARCH
2009年
34期
6617-6621
,共5页
邵英%张舵%荣莉%刘扬%兰珊珊%彭维海
邵英%張舵%榮莉%劉颺%蘭珊珊%彭維海
소영%장타%영리%류양%란산산%팽유해
聚L-乳酸%羟基磷灰石%成骨细胞%细胞黏附%细胞增殖
聚L-乳痠%羥基燐灰石%成骨細胞%細胞黏附%細胞增殖
취L-유산%간기린회석%성골세포%세포점부%세포증식
背景:聚乳酸类高分子聚合物与羟基磷灰石复合材料的研究是目前骨修复材料的研究热点.聚L-乳酸/聚L-乳酸接枝的纳米羟基磷灰石(PLLA/PLLA-gHAP)为具有独立知识产权的新型骨修复材料,具有较好的力学强度,其与骨修复的功能细胞成骨细胞间的相互作用尚无相关报道.目的:观察新型骨修复材料PLLA/PLLA-gHAP对成骨细胞黏附、增殖功能的影响.设计、时间及地点:细胞学体外实验,于2006-03/2007-03在东北师范大学细胞与遗传研究所完成.材料:①将骨修复材料PLLA/PLLA-gHAP及PLLA制备成2 cm×2 cm×0.5 mm的板,浸泡、冲洗、消毒灭菌后备用.②将PLLA/PLLA-gHAP、PLLA两种板剪成0.5 cm×0.5 cm×0.5 mm的小块,加入DMEM培养液,配成10,100 g/L两种质量浓度的浸提液,于37℃孵箱中浸提72 h,4℃保存备用.方法:取孕19～20 d的Wistar大鼠胎鼠的颅骨进行成骨细胞体外培养.①光镜下观察成骨细胞形态,应用碱性磷酸酶染色、钙结节染色对其进行鉴定.②将成骨细胞分别接种在PLLA/PLLA-gHAP和PLLA材料板上,24 h后应用细胞技术器检测细胞黏附数量,扫描电镜观察细胞形态.③MTT法测定成骨细胞在不同质量浓度(10,100 g/L)PLLA,PLLA-gHAP材料浸提液中的增殖情况,并与PLLA材料进行对比.主要观察指标:①成骨细胞在PLLA/PLLA-gHAP和PLLA材料上的黏附数量和形态.②成骨细胞在PLLA/PLLA-gHAP和PLLA材料浸提液中的增殖情况.结果:①在PLLA/PLLA-gHAP表面黏附的细胞数略多于PLLA材料,且黏附于PLLA/PLLA-gHAP材料表面的成骨细胞直径较大,伸出的伪足与材料间形成一种牢固的锚状结构.而在PLLA表面的细胞细胞直径较小,多为球形,很少伸出伪足.②10 g/L PLLA/PLLA-gHAP浸提液组的细胞活性明显高于10 g/LPLLA浸提液组和空白对照组;两种材料100 g/L质量浓度组的细胞活性均低于空白对照组,但PLLA/PLLA-gHAP组的细胞活性仍高于PLLA组.结论:①成骨细胞在PLLA/PLLA-gHAP材料表面较PLLA材料表面显示更好的黏附能力.②成骨细胞在PLA/PLLA-gHAP材料浸提液中较在PLLA材料浸提掖中显示更好的增殖能力.③新型PLLA/PLLA-gHAP材料具有较好的成骨细胞相容性,可能作为骨修复材料使用.
揹景:聚乳痠類高分子聚閤物與羥基燐灰石複閤材料的研究是目前骨脩複材料的研究熱點.聚L-乳痠/聚L-乳痠接枝的納米羥基燐灰石(PLLA/PLLA-gHAP)為具有獨立知識產權的新型骨脩複材料,具有較好的力學彊度,其與骨脩複的功能細胞成骨細胞間的相互作用尚無相關報道.目的:觀察新型骨脩複材料PLLA/PLLA-gHAP對成骨細胞黏附、增殖功能的影響.設計、時間及地點:細胞學體外實驗,于2006-03/2007-03在東北師範大學細胞與遺傳研究所完成.材料:①將骨脩複材料PLLA/PLLA-gHAP及PLLA製備成2 cm×2 cm×0.5 mm的闆,浸泡、遲洗、消毒滅菌後備用.②將PLLA/PLLA-gHAP、PLLA兩種闆剪成0.5 cm×0.5 cm×0.5 mm的小塊,加入DMEM培養液,配成10,100 g/L兩種質量濃度的浸提液,于37℃孵箱中浸提72 h,4℃保存備用.方法:取孕19～20 d的Wistar大鼠胎鼠的顱骨進行成骨細胞體外培養.①光鏡下觀察成骨細胞形態,應用堿性燐痠酶染色、鈣結節染色對其進行鑒定.②將成骨細胞分彆接種在PLLA/PLLA-gHAP和PLLA材料闆上,24 h後應用細胞技術器檢測細胞黏附數量,掃描電鏡觀察細胞形態.③MTT法測定成骨細胞在不同質量濃度(10,100 g/L)PLLA,PLLA-gHAP材料浸提液中的增殖情況,併與PLLA材料進行對比.主要觀察指標:①成骨細胞在PLLA/PLLA-gHAP和PLLA材料上的黏附數量和形態.②成骨細胞在PLLA/PLLA-gHAP和PLLA材料浸提液中的增殖情況.結果:①在PLLA/PLLA-gHAP錶麵黏附的細胞數略多于PLLA材料,且黏附于PLLA/PLLA-gHAP材料錶麵的成骨細胞直徑較大,伸齣的偽足與材料間形成一種牢固的錨狀結構.而在PLLA錶麵的細胞細胞直徑較小,多為毬形,很少伸齣偽足.②10 g/L PLLA/PLLA-gHAP浸提液組的細胞活性明顯高于10 g/LPLLA浸提液組和空白對照組;兩種材料100 g/L質量濃度組的細胞活性均低于空白對照組,但PLLA/PLLA-gHAP組的細胞活性仍高于PLLA組.結論:①成骨細胞在PLLA/PLLA-gHAP材料錶麵較PLLA材料錶麵顯示更好的黏附能力.②成骨細胞在PLA/PLLA-gHAP材料浸提液中較在PLLA材料浸提掖中顯示更好的增殖能力.③新型PLLA/PLLA-gHAP材料具有較好的成骨細胞相容性,可能作為骨脩複材料使用.
배경:취유산류고분자취합물여간기린회석복합재료적연구시목전골수복재료적연구열점.취L-유산/취L-유산접지적납미간기린회석(PLLA/PLLA-gHAP)위구유독립지식산권적신형골수복재료,구유교호적역학강도,기여골수복적공능세포성골세포간적상호작용상무상관보도.목적:관찰신형골수복재료PLLA/PLLA-gHAP대성골세포점부、증식공능적영향.설계、시간급지점:세포학체외실험,우2006-03/2007-03재동북사범대학세포여유전연구소완성.재료:①장골수복재료PLLA/PLLA-gHAP급PLLA제비성2 cm×2 cm×0.5 mm적판,침포、충세、소독멸균후비용.②장PLLA/PLLA-gHAP、PLLA량충판전성0.5 cm×0.5 cm×0.5 mm적소괴,가입DMEM배양액,배성10,100 g/L량충질량농도적침제액,우37℃부상중침제72 h,4℃보존비용.방법:취잉19～20 d적Wistar대서태서적로골진행성골세포체외배양.①광경하관찰성골세포형태,응용감성린산매염색、개결절염색대기진행감정.②장성골세포분별접충재PLLA/PLLA-gHAP화PLLA재료판상,24 h후응용세포기술기검측세포점부수량,소묘전경관찰세포형태.③MTT법측정성골세포재불동질량농도(10,100 g/L)PLLA,PLLA-gHAP재료침제액중적증식정황,병여PLLA재료진행대비.주요관찰지표:①성골세포재PLLA/PLLA-gHAP화PLLA재료상적점부수량화형태.②성골세포재PLLA/PLLA-gHAP화PLLA재료침제액중적증식정황.결과:①재PLLA/PLLA-gHAP표면점부적세포수략다우PLLA재료,차점부우PLLA/PLLA-gHAP재료표면적성골세포직경교대,신출적위족여재료간형성일충뢰고적묘상결구.이재PLLA표면적세포세포직경교소,다위구형,흔소신출위족.②10 g/L PLLA/PLLA-gHAP침제액조적세포활성명현고우10 g/LPLLA침제액조화공백대조조;량충재료100 g/L질량농도조적세포활성균저우공백대조조,단PLLA/PLLA-gHAP조적세포활성잉고우PLLA조.결론:①성골세포재PLLA/PLLA-gHAP재료표면교PLLA재료표면현시경호적점부능력.②성골세포재PLA/PLLA-gHAP재료침제액중교재PLLA재료침제액중현시경호적증식능력.③신형PLLA/PLLA-gHAP재료구유교호적성골세포상용성,가능작위골수복재료사용.
