医学分子生物学杂志
醫學分子生物學雜誌
의학분자생물학잡지
FOREIGN MEDICAL SCIENCES
2009年
3期
235-238
,共4页
东莉洁%李晓冬%何津岩%姚智%杨洁
東莉潔%李曉鼕%何津巖%姚智%楊潔
동리길%리효동%하진암%요지%양길
人类PSF蛋白%pEGFP-C2%重组质粒%融合蛋白
人類PSF蛋白%pEGFP-C2%重組質粒%融閤蛋白
인류PSF단백%pEGFP-C2%중조질립%융합단백
目的 将人类PSF基因定向连人pEGFP-C2质粒,使PSF蛋白可与绿色荧光蛋白在HeLa细胞内融合表达,为进一步研究PSF蛋白的功能及定位奠定实验基础.方法 采用EcoRⅠ和SalⅠ双酶切方法,从pGEX-2TK-PSF质粒中获得PSF蛋白的cDNA全长;连入pEGFP-C2质粒的C端.将构建成功的pEGFP-C2-PSF质粒转染人HeLa 细胞,荧光显微镜下观察绿色荧光蛋白表达.结果 ①将该质粒进行双酶切鉴定可见PSF片段;②转染重组质粒后可观察到绿色荧光蛋白的表达.结论 ① PSF cDNA全长成功连入pEGFP-C2质粒;② PSF蛋白可与绿色荧光蛋白在HeLa细胞中融合表达.
目的 將人類PSF基因定嚮連人pEGFP-C2質粒,使PSF蛋白可與綠色熒光蛋白在HeLa細胞內融閤錶達,為進一步研究PSF蛋白的功能及定位奠定實驗基礎.方法 採用EcoRⅠ和SalⅠ雙酶切方法,從pGEX-2TK-PSF質粒中穫得PSF蛋白的cDNA全長;連入pEGFP-C2質粒的C耑.將構建成功的pEGFP-C2-PSF質粒轉染人HeLa 細胞,熒光顯微鏡下觀察綠色熒光蛋白錶達.結果 ①將該質粒進行雙酶切鑒定可見PSF片段;②轉染重組質粒後可觀察到綠色熒光蛋白的錶達.結論 ① PSF cDNA全長成功連入pEGFP-C2質粒;② PSF蛋白可與綠色熒光蛋白在HeLa細胞中融閤錶達.
목적 장인류PSF기인정향련인pEGFP-C2질립,사PSF단백가여록색형광단백재HeLa세포내융합표체,위진일보연구PSF단백적공능급정위전정실험기출.방법 채용EcoRⅠ화SalⅠ쌍매절방법,종pGEX-2TK-PSF질립중획득PSF단백적cDNA전장;련입pEGFP-C2질립적C단.장구건성공적pEGFP-C2-PSF질립전염인HeLa 세포,형광현미경하관찰록색형광단백표체.결과 ①장해질립진행쌍매절감정가견PSF편단;②전염중조질립후가관찰도록색형광단백적표체.결론 ① PSF cDNA전장성공련입pEGFP-C2질립;② PSF단백가여록색형광단백재HeLa세포중융합표체.